Виробництво моноклональних антитіл у E. coli: Досягнення та перспективи

Моноклональні антитіла (мАб), які є розчинними глікопротеїнами приблизно 150 кДа, що складаються з важких і легких ланцюгів, широко використовуються у лікуванні раку та автоімунних захворювань. У останні роки методи виробництва мАб та їх похідних стали розмаїтнішими, з Escherichia coli ( E. coli ) як важливим хостом для виробництва фрагментів антитіл.

У виробництві мАб компанія Yaohai Bio-Pharma відзначається багатим досвідом у сфері НД. Дяки зрілій платформі, сучасному обладнанню та інноваційній технології повноекологічного вираження, Yaohai пропонує комплексні послуги від будівництва банку клітин до заповнення та закриття, повністю налаштовуючи мАб під потреби клієнтів.

Методи виробництва мАб у E. coli

E. coli дає швидкий ріст, низькі витрати, простоту у використанні та гнучкість в експресії у цитоплазмі, періплазмі або культурній середовищі. У E. coli виробництво антитіл головним чином поділяється на періплазматичне, цитоплазматичне та напівоксидоване цитоплазматичне виробництво, а також безклітинні системи синтезу білків (CFPS). Періплазматичне виробництво досягло високих показників продукції функціонального повної довжини імуноглобуліну G (FL-IgG) через оптимізацію балансу експресії та секреції. Цитоплазматичне виробництво стикається з викликами через зменшувальний середовище, але функціональний FL-IgG був успішно виражений за допомогою інженерних штамів для створення окислювального середовища. Система CFPS досягла ефективного виробництва антитіл шляхом регулювання регіонів початку перекладу та додавання хелпер-білків.

Характеристика антитіл та контроль якості

Контроль якості антитіл включає біохімічну, біофізичну та біологічну характеристики. Біохімічна характеристика аналізує структуру антитіл, їх послідовність та гликозування, серед іншого. Біофізична характеристика оцінює однорідність, розчинність та стійкість. Біологічна характеристика перевіряє біоактивність антитіл, включаючи ЗДК та КДК, серед іншого. Незважаючи на те, що негликозиловані антитіла, що виробляються у E. coli, не мають певних функцій Fc ефекторів, дослідження показали, що їх стійкість схожа на стійкість гликозилованих антитіл, а також вони демонструють подібну терапевтичну ефективність у тестованих умовах.

Щоб відновити чи покращити імунні ефекти негликозилованих антитіл, можна інженерити домени Fc. Наприклад, можна відбирати мутанти, які зв'язуються з FcɣRI, для покращення функції ефектора ЗДК. Ці інженеровані антитіла демонструють значні біологічні ефекти та терапевтичний потенціал як in vitro, так і in vivo.

Висновок

У підсумку, виробництво недеґлікозилованих антитіл у E. coli зробило важливий крок уперед у галузі виробництва антитіл, зменшуючи витрати та покращуючи якість. Незважаючи на те, що вони не мають деяких функцій Fc-эффекторів, через інженерний дизайн вони проявляють покращені ефекторні функції та терапевтичний потенціал. В очікуванні, що більше недеґлікозилованих антитіл, випущених у E. coli, увійде до клінічних досліджень у майбутньому.

Ми також активно шукаємо глобальних партнерів, які є установами або особами. Ми пропонуємо найбільш конкурентоспроможну компенсацію у галузі. Якщо в вас є будь-які питання, будь ласка, не соромтеся звертатися до нас за [email protected]