Виробництво моноклональних антитіл у E. coli: досягнення та перспективи

Моноклональні антитіла (mAbs), які є розчинними глікопротеїнами приблизно 150 кДа, що складаються з важких і легких ланцюгів, широко використовуються в лікуванні раку та аутоімунних захворювань. Останніми роками методи виробництва моноклональних антитіл та їх похідних стали різноманітними, з Escherichia coli (E. палички), що стає важливим господарем для виробництва фрагментів антитіл.

У виробництві моноклональних антитіл Yaohai Bio-Pharma має багатий досвід досліджень і розробок. Завдяки розвинутій платформі, сучасному обладнанню та інноваційній повністю екологічній технології експресії Yaohai пропонує комплексні послуги від створення банку клітин до заповнення та завершення, повністю налаштовуючи mAb для клієнтів.

Методи отримання mAb в E. coli

Кишкова паличка забезпечує швидкий ріст, низьку вартість, легкість роботи та гнучкість у експресії в цитоплазмі, периплазмі або культуральному середовищі. У E. coli виробництво антитіл в основному класифікується на периплазматичне, цитоплазматичне та напівокислене цитоплазматичне виробництво, а також системи безклітинного синтезу білка (CFPS). Периплазматичне виробництво досягло високого виходу функціонального повнорозмірного імуноглобуліну G (FL-IgG) завдяки оптимізованому балансу експресії та секреції. Цитоплазматичне виробництво стикається з проблемами через відновлювальне середовище, але функціональний FL-IgG успішно експресується інженерними штамами для створення окисного середовища. Система CFPS досягла ефективного виробництва антитіл шляхом регулювання областей ініціації трансляції та додавання білків-шаперонів.

Характеристика антитіл і контроль якості

Контроль якості антитіл включає біохімічні, біофізичні та біологічні характеристики. Біохімічна характеристика аналізує структуру антитіла, послідовність і глікозилювання, серед іншого. Біофізична характеристика оцінює однорідність, розчинність і стабільність. Біологічна характеристика підтверджує біоактивність антитіл, включаючи ADCC і CDC, серед інших. Незважаючи на те, що деглікозильовані антитіла, вироблені в E. coli, не мають певних ефекторних функцій Fc, дослідження показали, що їх стабільність подібна до стабільності глікозильованих антитіл, і вони демонструють подібну терапевтичну ефективність у перевірених умовах.

Для відновлення або посилення імунних ефектів деглікозильованих антитіл можна сконструювати домени Fc. Наприклад, мутанти, які зв’язуються з FcɣRI, можуть бути скринінговані для посилення ефекторної функції ADCC. Ці сконструйовані антитіла демонструють значні біологічні ефекти та терапевтичний потенціал як in vitro, так і in vivo.

Висновок

Таким чином, виробництво деглікозильованих антитіл у E. coli досягло значного прогресу в галузі виробництва антитіл, знизивши витрати та покращивши якість. Хоча їм не вистачає певних ефекторних функцій Fc, завдяки технічному дизайну вони демонструють покращені ефекторні функції та терапевтичний потенціал. Очікується, що більше деглікозильованих антитіл, вироблених у E. coli, увійдуть у клінічні дослідження в майбутньому.

Ми також активно шукаємо інституційних або індивідуальних глобальних партнерів. Ми пропонуємо найконкурентнішу компенсацію в галузі. Якщо у вас виникли запитання, зв’яжіться з нами за адресою [email protected]