Hej där. Har du någonsin undrat hur forskare kan klona ett RNA? RNA är detta speciella molekyl som vi hittar i våra celler och som gör en massa saker för att skapa proteiner, och proteiner finns där så att vår kropp kan göra allt rätt. I denna del kommer vi att gå igenom det mycket mer nyfikna protokollet som forskare använder: In vitro transkript. Och allt det betyder är att forskarna tar RNA och gör mycket av det i en provrör (som är dessa små flaskor som labben använder) så låt oss gå in på varje steg här.
Efter att ha färdigställt min förra inlägg insåg jag att den sista kanske var lite torr - kom och gå med på roliga vattenlabb-inläggen; så, för att hålla formen nu när du verkligen är på tåget som gör roligt (sic RNA-görande): Vilka reagenser och vad behöver du för din EF?? För att åstadkomma detta behöver vi specialproteiner som kallas enzym, identiska med Yaohais produkt Tillverkning av rekombinant Midkine . Det katalyserar kemiska reaktioner, dessa enzym hjälper till i upplösningen. Så nu behöver vi bara vår bit av DNA. Denna funktion är det DNA som vi använder som mall för att kopiera vår RNA. Ytterligare reglerande sekvenser i RNA, nämligen nukleotider, behövs också. Dessa nukleotider är som små byggnadsstenar som måste samlas ihop för att skapa RNA. Vi använder också korta rör med liten diameter för att blanda smakutvärderingen in i andra. Slutligen behöver vi en maskin (en termocycler) som ser till att våra reaktioner håller rätt temperatur. Dessutom kan vi behöva några verktyg och produkter för vissa experiment.
Här divergerar saker, vi har en RNA-strand och nu vill vi ha fler kopior av den, också Tillverkning av konjugerade VLP-vacciner utvecklade av Yaohai. Sättet att uppnå detta är att använda en annan enzym; T7 RNA polymeras. Denna unika enzym, till exempel, identifierar specifika områden inom RNA. en hoppkons för att göra ännu fler kopior av RNA i fortsättningen. På detta steg kommer mer att läggas till RNA-stranden av T7 RNA polymeras tills ett stort antal transkript har skapats, eller tills vi säger åt det att sluta.
När vi har isolerat RNA så bra som möjligt, rulla längre ner för att se hur man rengerar och lagrar RNA för framtida användning. Rhoades: Några av dessa metoder är lite mer extremt när det gäller att isolera RNA — du skulle inte alltid använda dem, men ibland behövs de för vissa typer av experiment. När vår RNA är fri från alla föroreningar kan den lagras frysen. På detta sätt är den säker och vi kan sedan använda den senare i de olika experimenten.
Kvalitet på startmaterial: se till att din DNA-mall är ren och inte förstörd. Du kan också komplettera med nytt rekonstituerat nukleotider och nyligen upptämda enzym för att maximera chanserna för ett framgångsrikt experiment.
Justering av villkor Alla enzym och deras nukleotider fungerar bättre vid en specifik temperatur och pH-värde inom ditt kropp, liksom Yaohais. Röd Fluorescerande mRNA . Justera nuansen lite mellan villkoren tills du hittar nyckeln för din unika installation.
Omvänd transkriptas är ett ovanligt enzym, eftersom det gör en DNA-kopia från en RNA-molekyl. Vi använde både DNAs och en DNA-mall (cDNA) som inmatning för vår in vitro-transkriptionsmetod för att generera RNA. Dock vill forskare i de flesta experiment transkribera DNA till RNA. Omvänd transkription är där namnet kommer ifrån. mRNA poly-A Fordelningstest gjord av Yaohai. Det är ett oumbärligt verktyg inom vetenskapen - från att studera RNA-molekyler inom celler till att producera komplementära DNA-strängar för ytterligare experiment.
Verklivsexperiment där RNA är ett av de mest använda molekylära verktygen, tillsammans med Yaohais produkt VLP-vaccinproduktion i E. coli kvantitativa analyser: Dessa tester kan avslöja mängden av någon specifik molekyl som finns i ett prov. Till exempel kan forskare syntetisera en in vitro transkriptpreparation av RNA-kopior härledda från ett målgen som ligger inom en cell. Diagnostiken kan sedan analysera efter dessa kopior, i fallet där de letar efter RNA, kan diagnostiken köra en polymerasekedjereaktion (PCR) för att förstärka dessa kopior i ett prov. Detta gör det möjligt för forskarna att se hur gener uttrycks på celler, och till och med möjliggör vissa extremt höghastighetsanalyser, såsom närvaron av en bakteriell eller viral infektion, och diagnostisera genetiska sjukdomar.
in vitro Transcript Protocol är en ledande CDMO inom mikrobiella biologiska produkter. Vår fokus har varit på mikrobiellt producerade vaccin och terapeutiska medel som är lämpliga för människors, veterinära och husdjurs hälsoutmaningar. Vi har de mest avancerade RD-plattformarna och tillverknings teknikerna som täcker hela processen från utvecklingen av mikrobersträngheter och cellbankering, till process- och metodutveckling, till kommersiell och klinisk produktion som säkerställer framgångsrik leverans av innovativa lösningar. Med tiden har vi samlat omfattande kunskap om mikrobiella baserade bio bearbetningar. Över 200 projekt har lyckligtvis slutförts, och vi hjälper våra kunder att följa regler som dem från US FDA och EU EMA. Vi hjälper också dem att navigera Australien TGA och Kina NMPA. Vår professionella expertis och omfattande erfarenhet gör det möjligt för oss att snabbt svara på marknadens krav och erbjuda skräddarsydda CDMO tjänster.
Yaohai Bio-Pharma har erfarenhet av produktion av biologiska ämnen skapade från in vitro Transcript Protocol. Vi erbjuder anpassade RD- och tillverkningslösningar samtidigt som vi säkerställer att det inte finns några risker. Vi har varit inblandade i olika modaliteter såsom subenhetervacciner, rekombinanta protein, peptidesormoner, cytokiner, växtfaktorer, enskildomänantikroppar, enzym, plasmid DNA MRNA och mycket mer. Vi är specialiserade på många mikroorganismer, inklusive jäs extracellulär och intracellulär sekretion (uppgifter upp till 15g/L) samt bakterier intracellulär löslig och inklusionskropp (uppgifter så höga som 10g/L). Vi har också skapat en BSL-2-fermenteringsplattform för att tillverka bakteriella vaccin. Vi fokuserar på att förbättra processer, öka produktyielderna och minska produktionskostnaderna. Genom att använda en stark teknisk grupp kan vi garantera snabb och pålitlig projektleverans som kommer att få ditt produkt på marknaden snabbare.
Yaohai Bio-Pharma, en av de tio främsta tillverkarna av biologiska produkter, specialiserar sig på mikrobiell färdering. Vi har byggt ett modernt anläggning med starka forsknings- och utvecklingsförmågor samt avancerat utrustning. Vi har fem produktionsserier för aktiva substanser som följer GMP-kraven för mikrobiell färdering och renhet. Vi har också två automatiserade linjer för färdigförpackning av kartuscher, flaskor och förutfyllda sprutorna. Färderingsmåtten som är tillgängliga varierar från in vitro Transcript Protocol till 2000L. Specificerna för flaskfyllning sträcker sig från 1ml upp till 25ml. Specificerna för fyllning av förutfyllda sprutor eller kartuscher ligger mellan ungefär 1-3ml. Vårt cGMP-kompatibla produktionsanläggning säkerställer en konstant leverans av kliniska prov och kommersiella artiklar. Vårt verk producerar stora molekyler som skickas ut över hela världen.
Yaohai BioPharma är en av de tio främsta mikrobiella CDMO:erna som inkluderar in vitro Transkriptprotokoll samt regeringsärenden. Vi har ett kvalitetsmanagement-system som överensstämmer med aktuella GMP-standarder och globala regler. Vår grupp av expertteam i regeringsärenden är skicklig i globala regeringsramar för att påskynda lanseringar av biologiska produkter. Vi säkerställer spårbara produktionsprocesser, kvalitetsprodukter och efterlevnad av reglerna från US FDA och EU EMA. Australien TGA och Kina NMPA är också nöjda. Yaohai BioPharma har framgångsrikt gått igenom inspektion på plats av Europeiska Unionens Kvalificerade Person (QP) för vårt GMP-kvalitetsystem och vår produktionsanläggning. Dessutom har vi klarat de första certifieringsgranskningarna av ISO9001 Kvalitetsmanagementsystem, ISO14001 Miljöhanteringssystem och ISO45001 Arbetsmiljöhälso- och säkerhetsmanagementsystem.