Hej där. Har du någonsin undrat hur forskare kan klona ett RNA? RNA är denna speciella molekyl som vi hittar i våra celler som gör en massa saker för att göra proteiner, och proteinerna finns där så att vår kropp kan göra alla rätt saker. I den här delen kommer vi att gå igenom det mycket mer märkliga protokollet som används av forskare: In vitro-transkript. Och allt som betyder är att forskare tar RNA och gör mycket av det i ett provrör (vilket är den här lilla burken som laboratorier använder) så låt gå in på varje steg här.
Efter att ha avslutat mitt förra inlägg insåg jag att det sista kan ha varit ett litet torrt-kom och häng med-det-roliga-i-våta-labbet-inlägg; så, i linje med formen nu när du verkligen är på det roliga (sic RNA-framställning) tåget: Vilka reagenser andc kommer att behöva för din EF?? För att åstadkomma detta kommer vi att behöva speciella proteiner som kallas enzymer, identiska med Yaohais produkt Rekombinant Midkine Manufacturing. Det katalyserar de kemiska reaktionerna, dessa enzymer hjälper till med nedbrytningen. Så nu behöver vi bara vår bit av DNA. Denna funktion är det DNA som vi använder som mall för att kopiera över för vårt RNA. Ytterligare regulatoriska sekvenser i RNA, nämligen nukleotider, behövs också. Dessa nukleotider är som små byggstenar som måste sättas ihop för att göra RNA. Vi använder också korta rör med liten diameter för att knåda smakutvärderingen till andra. Till sist behöver vi en maskin (en termocykler) som ser till att våra reaktioner har rätt temperatur. Dessutom kan vi behöva några verktyg och produkter för vissa experiment.
Så här skiljer sig saker, vi har en RNA-sträng och nu vill vi gärna ha fler kopior av den, även Tillverkning av konjugat VLP-vacciner utvecklad av Yaohai. Sättet att uppnå att använda ett annat enzym; T7 RNA-polymeras. Detta unika enzym känner till exempel igen specifika områden inom RNA:t. en hoppkon för att göra många fler kopior av RNA i fortsättningen. Vid denna tidpunkt kommer mer att läggas till RNA-strängen av T7-RNA-polymeraset tills en massa av transkript har skapats, eller tills vi säger åt det att sluta.
Efter att vi har isolerat RNA så mycket som möjligt, scrolla längre ner för att se hur man städar upp och lagrar RNA för framtida bruk. Rhoades: Vissa av dessa metoder är lite mer på den extrema sidan när det gäller att isolera RNA - du skulle inte alltid använda det, men ibland för vissa typer av experiment behövs det. När vårt RNA är fritt från föroreningar kan det förvaras fryst. På så sätt är detta säkert och vi kan sedan använda det senare i de olika experimenten.
Kvaliteten på utgångsmaterialet: se till att din dna-mall är ren och inte helt uppbränd. Du kan också komplettera med nyrekonstituerade nukleotider och nytinade enzymer för att maximera chanserna till ett lyckat experiment.
Finjusterande förhållanden Alla enzymer och deras nukleotider fungerar bättre vid en specifik temperatur och pH i din kropp, såväl som Yaohais Röd fluorescerande mRNA. Justera nu nyansen lite mellan förhållandena tills du kommer dit nyckeln är för din unika installation.
Omvänt transkriptas är ett ovanligt enzym, eftersom det gör en DNA-kopia från en RNA-molekyl. Vi använde både DNas och en DNA-mall (cDNA) som input för vår in vitro-transkriptmetod för att generera RNA. Men i de flesta experiment skulle forskare vilja transkribera DNA till RNA. Omvänd transkription är där den får sitt namn på samma sätt som mRNA poly-A distributionstestning gjord av Yaohai. Det är ett ovärderligt verktyg över hela vetenskapen - från att studera RNA-molekyler inuti celler till att producera komplementära DNA-strängar för ytterligare experiment.
Verkliga experiment där RNA är ett av de mest använda molekylära verktygen, tillsammans med Yaohais produkt VLP-vaccinproduktion i E. coli. Kvantitativa analyser: Dessa tester kan avslöja mängden av någon specifik molekyl som finns i ett prov. Till exempel kan forskare syntetisera en in vitro-transkriptberedning av RNA-kopior som härrör från en målgen som finns i en cell. Diagnostiken kan sedan analysera för dessa kopior, i det fall de är. letar efter RNA, kan diagnostiken köra en polymeraskedjereaktion (PCR) för att amplifiera dessa kopior i ett exempel. Detta gör det möjligt för forskare att se hur gener uttrycks på celler, och tillåter till och med vissa extremt högkapacitetsanalyser, såsom närvaron av en bakteriell eller viral infektion, och diagnostisera genetiska störningar.
in vitro Transcript Protocol är en ledande CDMO inom mikrobiologisk biologi. Vårt fokus har legat på mikrobiellt producerade vacciner och läkemedel som är lämpade för hälsovård för människor, veterinärer och husdjur. Vi har de mest banbrytande RD-plattformarna och tillverkningsteknologin som täcker hela proceduren som börjar med utvecklingen av mikrobiella stammar och cellbanking, till process- och metodutveckling, till kommersiell och klinisk produktion som säkerställer framgångsrik leverans av innovativa lösningar. Med tiden har vi samlat på oss enorm kunskap om mikrobiell baserad biobearbetning. Över 200 projekt har slutförts framgångsrikt, och vi hjälper våra kunder att följa bestämmelser som de av amerikanska FDA och EU EMA. Vi hjälper dem också att navigera i Australien TGA och Kina NMPA. Vår professionella expertis och långa erfarenhet gör att vi snabbt kan svara på marknadens krav och tillhandahålla skräddarsydda CDMO-tjänster.
Yaohai Bio-Pharma har erfarenhet av produktion av biologiska läkemedel skapade från in vitro Transcript Protocol. Vi erbjuder skräddarsydda RD- och tillverkningslösningar samtidigt som vi ser till att det inte finns några risker. Vi har varit involverade i olika modaliteter såsom subenhetsvacciner rekombinanta, peptidhormoner, cytokiner, tillväxtfaktorer, enkeldomänantikroppsenzymer, plasmid-DNA MRNA och många fler. Vi är specialister på många mikroorganismer, inklusive jäst extracellulär och intracellulär sekretion (avkastning upp till 15g/L) samt bakterier intracellulärt löslig och inklusionskropp (avkastning så hög som 10g/L). Vi har också skapat en BSL-2 fermenteringsplattform för att skapa bakterievacciner. Vi fokuserar på att förbättra processer, öka produktutbytet och sänka produktionskostnaderna. Genom att använda ett starkt teknikteam kan vi säkerställa snabb och pålitlig projektleverans som kommer att ta ut din produkt snabbare på marknaden.
Yaohai Bio-Pharma, en topp 10 tillverkare av biologiska produkter, specialiserar sig på mikrobiell fermentering. Vi har byggt en modern anläggning med robust RD-kapacitet och avancerad utrustning. Vi har fem tillverkningslinjer för läkemedelssubstanser som uppfyller GMP-kraven för mikrobiell fermentering och rening. Vi har också två automatiska fyllningslinjer för patroner, flaskor och förfyllda sprutor. De jäsningsskalor som är tillgängliga för användning sträcker sig från in vitro Transcript Protocol till 2000L. Specifikationerna för fyllning av en flaska sträcker sig från 1 ml upp till 25 ml. Fyllningsspecifikationerna för förfylld spruta eller patron sträcker sig från cirka 1-3 ml. Vår cGMP-kompatibla produktionsanläggning säkerställer konstant tillförsel av såväl kliniska prov som kommersiella föremål. Vår anläggning producerar stora molekyler som skickas till världen.
Yaohai BioPharma är en topp 10 mikrobiell CDMO som innehåller in vitro transkriptprotokoll samt regulatoriska frågor. Vi har ett kvalitetsledningssystem som är i linje med gällande GMP-standarder samt globala regler. Vårt team av regulatoriska experter är skickliga i globala regulatoriska ramverk för att påskynda biologiska lanseringar. Vi säkerställer spårbara produktionsprocesser kvalitetsprodukter, samt att följa reglerna från US FDA och EU EMA. Australien TGA och Kina NMPA är också nöjda. Yaohai BioPharma har framgångsrikt klarat revisionen på plats av Europeiska unionens kvalificerade person (QP) för vårt GMP-kvalitetssystem såväl som vår produktionsanläggning. Dessutom har vi godkänt de första certifieringsrevisionerna av ISO9001 kvalitetsledningssystem, ISO14001 miljöledningssystem och ISO45001 arbetsmiljöledningssystem.