Salut. Te-ai gândit vreodată cum o să își cloneze cercetătorii o RNA? RNA este această moleculă specială pe care o găsim în celulele noastre care face o mulțime de lucruri pentru a produce proteine, iar proteinele sunt acolo ca să facă corpul nostru să funcționeze corect. În această ediție, vom parcurge un protocol mult mai curios folosit de cercetători: transcrierea in vitro. Și tot ceea ce asta înseamnă este că cercetătorii produc multă RNA într-un tub de probă (care este acel mic vas pe care laboratoarele îl folosesc) deci să mergem prin fiecare etapă.
După ce am terminat postarea mea anterioară, mi-am dat seama că ultima ar fi putut fi puțin secă - veniți să vă alăturați plăcerii din laboratorul umed; deci, păstrând forma, acum când sunteți cu adevărat pe trenul plăcerii (adică RNA-făcere): Ce reagenti și veți avea nevoie pentru EF dvs.? Pentru a realiza acest lucru, avem nevoie de proteine speciale numite enzyme, identice produsului lui Yaohai Producerea Recombinantă de Midkine . Aceasta catalizează reacțiile chimice, aceste enzyme ajută la descompunere. Acum avem nevoie doar de un segment de ADN. Această funcție este ADN-ul pe care îl folosim ca șablon pentru a copia ARN-ul. Secvențe regulate suplimentare în ARN, anume nucleotidele, sunt de asemenea necesare. Aceste nucleotide sunt ca niște bucățele mici de construcție care trebuie asamblate pentru a crea ARN-ul. De asemenea, folosim tuburi scurte cu diametru mic pentru a introduce evaluarea gustului în alte analize. În sfârșit, avem nevoie de o mașină (un termociclic) care să se asigure că reacțiile noastre sunt la temperatură potrivită. De asemenea, s-ar putea să avem nevoie de câteva instrumente și produse pentru anumite experimente.
Aici lucrurile se împart, am obținut un șir de RNA și acum dorim să avem mai multe copii ale acestuia, de asemenea Producerea Vacinelor VLP Conjugate a fost dezvoltat de Yaohai. Modul de a realiza această operațiune este să folosim o altă enzymă; T7 RNA polymeraza. Această enzymă unică, de exemplu, recunoaște zone specifice din cadrul RNA. Un con de sărituri pentru producerea a multe mai multor copii de RNA în etapa următoare. La acest punct, mai multe nucleotide vor fi adăugate șirului de RNA de către T7 RNA polymeraza până când se va crea un transcrit masiv, sau până când i-o spunem noi să se oprească.
După ce am izolat RNA-ul într-un mod cât mai complet, scrolați mai jos pentru a vedea cum să curățați și stocați RNA-ul pentru utilizare ulterioară. Rhoades: Unele dintre aceste metode sunt puțin mai extreme în ceea ce privește izolare RNA - nu ați folosi întotdeauna această abordare, dar uneori, pentru anumite tipuri de experimente, este necesară. Odată ce RNA-ul nostru este liber de orice contaminanți, poate fi stocat înghețat. Acest lucru asigură siguranța și putem să-l utilizăm ulterior în diverse experimente.
Calitatea materialei de pornire: asigurați-vă că șablonul de ADN este curat și nu este deteriorat. Puteți suplimenta cu nucleotide reconstituite recent și enzime nou dezghețate pentru a maximiza șansele de succes al experimentului.
Ajustarea condițiilor: Toate enzimele și nucleotidele lor funcționează mai bine la o temperatură și un pH specific în interiorul corpului uman, precum și al lui Yaohai. MRNA Fluorescent Rosu . Acum ajustați puțin subtilitățile între condiții până când ajungeți acolo unde se află cheia pentru configurarea dvs. unică.
Transcriptaza inversă este o enzimă neobișnuită, deoarece creează o copie de ADN dintr-o moleculă de ARN. Am folosit atât DNAs cât și un șablon de ADN (cDNA) ca intrare pentru metoda noastră in vitro de generare a ARN-ului. Cu toate acestea, în majoritatea experimentelor, cercetătorii vor să transcrie ADN-ul în ARN. Transcrierea inversă primește numele său exact de aici. testarea distribuției poli-A a ARNm creată de Yaohai. Este un instrument foarte valoros în întreaga știință - de la studierea moleculelor de ARN din celule până la producerea de șiruri de ADN complementar pentru experimente ulterioare.
Experimente reale în care ARN-ul este una dintre cele mai utilizate instrumente moleculare, alături de produsul lui Yaohai. Producția de vaccin VLP în E. coli testele cuantitative: Aceste teste pot să reveleze cantitatea oricărui molecule specifică prezentă într-un eșantion. De exemplu, cercetătorii pot sintetiza o preparare in vitro de copii de RNA derivate dintr-un gen țintă situat în interiorul unei celule. Diagnosticul poate apoi efectua un test pentru acele copii; în cazul în care se caute RNA, diagnosticul poate executa o reacție în lanț cu polimeraza (PCR) pentru a amplifica acele copii într-un eșantion. Acest lucru permite cercetătorilor să vadă cum sunt exprimate genele pe celule și chiar să efectueze unele teste cu o productivitate extrem de ridicată, precum prezența unei infecții bacteriene sau virale, și să diagnoşeze afecțiuni genetice.
in vitro Transcript Protocol este un lider în CDMO de biologice microbien. Ne-am concentrat pe vaccinuri și terapii produse microbial care sunt potrivite pentru gestionarea sănătății umane, veterinare, precum și a animalelor de companie. Deținem cele mai inovatoare platforme de RD și tehnologie de fabricație care acoperă întregul proces, începând cu dezvoltarea stocurilor microbiene și bancarilor de celule, până la dezvoltarea procedurilor și metodelor, și producția clinică și comercială, asigurând livrarea cu succes a soluțiilor inovatoare. În timp, am acumulat o cunoștință vastă despre bio-procesarea bazată pe microbi. Peste 200 de proiecte au fost finalizate cu succes, iar noi ajutăm clienții noștri să se conformeze regulilor cum ar fi cele ale US FDA și EU EMA. Le oferim și ajutor pentru a naviga prin reglementările Australia TGA și China NMPA. Experțiza noastră profesională și experiența extensivă ne permite să răspundem rapid cerințelor pieței și să oferim servicii CDMO personalizate.
Yaohai Bio-Pharma are experiență în producerea de biologice create prin Protocolul de Transcriere in vitro. Ofertăm soluții personalizate de C&D și fabricație, asigurându-ne că nu există riscuri. Am fost implicați în diverse modalități, cum ar fi vaccinuri subunitare recombinate, hormoni peptidici, citokine, factori de creștere, antibody monoclonale cu domeniu unic, enzyme, ADN plasmidial, ARN-M și multe altele. Suntem specialiști în numeroase microorganisme, inclusiv secreție extracelulară și intracelulară a levurii (rendiment până la 15g/L) și bacterii intracelulare solubilă și corpuri de incluziune (rendiment cât mai ridicat de 10g/L). Am creat de asemenea o platformă de fermentație BSL-2 pentru a produce vaccinuri bacteriene. Ne concentrăm pe îmbunătățirea proceselor, creșterea rendimentului produselor și reducerea costurilor de producție. Folosind un echipă puternică de tehnologie, putem să ne asigurăm că livrarea proiectelor este promptă și de încredere, aducând produsul dumneavoastră mai repede pe piață.
Yaohai Bio-Pharma, unul dintre cei mai importanți zece producători de produse biologice, se specializează în fermentarea microbială. Am construit o facilitate modernă cu capacități puternice de C&D și echipamente avansate. De asemenea, dispunem de cinci linii de producție de substanțe medicamentoase care respectă cerințele GMP pentru fermentare și purificare microbienă, precum și două linii automate de umplere pentru cartușe, sticle și siringe preumplute. Scara de fermentare disponibilă variază între Protocolul de Transcripție in vitro și 2000L. Specificațiile de umplere ale unei sticle se situează între 1ml și 25ml, iar specificațiile de umplere ale siringelor sau cartușelor preumplute se situează între aproximativ 1-3ml. Facilitatea noastră de producție cGMP asigură o furnizare constantă atât de probe clinice, cât și de articole comerciale. Planta noastră produce molecule mari care sunt expediate în întreaga lume.
Yaohai BioPharma este un CDMO Microbial din topul 10 care integrează Protocolul de Transcripție in vitro precum și afaceri regulate. Avem un sistem de management al calității care este în conformitate cu standardele GMP actuale precum și cu reglementările globale. Echipa noastră de experți în reglementări este experimentată în cadrul regulilor regulate globale pentru a accelera lansările biologice. Asigurăm procese de producție urmărite, produse de calitate, precum și respectarea regulilor US FDA și EU EMA. Australia TGA și China NMPA sunt de asemenea mulțumite. Yaohai BioPharma a trecut cu succes auditul pe loc de muncă al Persoanei Calificate (QP) a Uniunii Europene pentru sistemul nostru de calitate GMP și instalația noastră de producție. Mai mult, am trecut primele certificări de audit ale Sistemului de Management al Calității ISO9001, Sistemului de Management al Mediului ISO14001 și Sistemului de Management al Sănătății și Siguranței Ocupaționale ISO45001.