În procesul de preparare a ARNm de transcripție in vitro (IVT), ADN-ul plasmidic linearizat este necesar ca matriță de transcripție pentru IVT cu ajutorul ARN polimerazei T7. ADN-ul plasmidic de înaltă calitate este crucial pentru transcripția in vitro.
Bazat pe platforma de servicii de pregătire a plasmidelor mature, Yaohai Bio-Pharma poate oferi un serviciu de preparare a ADN-ului plasmidic liniarizat de puritate ridicată și standard înalt pentru a obține o transcripție IVT eficientă.
Detalii despre servicii
| Proces | Service optional | Detalii despre servicii | Perioada de livrare (zi lucrătoare) |
| Prepararea plasmidelor circulare | Sinteza genelor | Sinteza genică (terță parte) | 7-10 |
| Amplificarea plasmidei | Amplificarea plasmidei | 2 |
| Extracția plasmidelor |
| Prepararea plasmidei liniarizate | Linearizarea și purificarea plasmidelor | Linearizarea plasmidelor | 1 |
| Linearizare purificare ADN |
| Controlul calității ADN-ului plasmidic | Puritatea concentrației | Spectrofotometrie ultravioletă (UV). | 1-2 |
| Conformația plasmidică | Electroforeză pe gel de agaroză (AGE) |
| Electroforeză capilară (CE)-opțional |
| Identificarea plasmidei | Identificarea enzimei de restricție/ AGE |
Caracteristicile noastre
- Plasmid șablon de tăiere liberă
Selectarea flexibilă a metodelor de liniarizare
- Rată ridicată de recuperare
Optimizarea metodelor de extracție și purificare a ADN-ului pentru a obține rate ridicate de recuperare.
- Control strict al calității
Standarde stricte de control al procesului, cu o rată de conformare superhelicală a probelor de plasmide pentru cercetare de peste 80%.
- Procesul platformei mature
Servicii de pregătire și control al calității plasmide la standarde înalte și de înaltă eficiență pentru a satisface nevoile experimentale.
Studiu de caz
Luând ca exemplu produsul mRNA_luciferase din catalogul Yaohai Bio-Pharma, eșantionul de plasmidă șablon de transcripție (grad de cercetare) are un raport superhelical de peste 90%, un raport de liniarizare aproape de 100% și un raport de transcriere ulterior de până la 1:200 ( ADN plasmid linearizat: ARNm).
ARNm_luciferaza obţinută prin prepararea unei plasmide linearizate ca matriţă este transfectată în celule 293T, iar activitatea reacţiei enzimă-substrat este evaluată la 24 de ore după transfecţie.
Poate fi detectat un semnal puternic de activitate a luciferazei, adică proteina luciferază este exprimată eficient, ceea ce sugerează că puritatea matriței de transcripție poate satisface pe deplin cerința de preparare a ARNm de înaltă calitate.
Testul raportului de plasmide supercoiled
Validarea expresiei ARNm a luciferazei in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NU
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
