Produsele obținute prin ciclizare in vitro și îmbogățirea cu RNază R necesită îndepărtarea suplimentară din transcripția in vitro (IVT), inclusiv substraturile neconsumate în reacția de ciclizare, produșii secundari de reacție și ARN-ul tăiat.
Yaohai Bio-Pharma are precipitații mature de LiCl, purificare cu mărgele magnetice, purificare auto-dezvoltată și alte soluții de purificare diversificate pentru a elimina în mod eficient diverse impurități și a pregăti circARN foarte pur.
Soluție de purificare pentru cantități mici de circARN pentru transfecția celulară și ca parte a experimentelor pe animale.
Soluție de purificare pentru cantități mici de circARN pentru transfecția celulară și ca parte a experimentelor pe animale.
Scenarii de aplicare cu o calitate superioară;
Proces de purificare stabil și scalabil pentru a îndeplini cerințele de producție GMP.
Proces | Service optional | Detalii despre servicii | Perioada de livrare (zi) | livrabile |
purificarea circRNA | Soluție de purificare convențională | Precipitarea clorurii de litiu | 1 | substanță medicamentoasă circARN |
Purificarea mărgele magnetice | ||||
Purificarea circARN foarte pură | Cromatografie lichidă preparativă de înaltă performanță (HPLC) | 1-2 | ||
Schimb tampon | Ultrafiltrarea | 1 | ||
controlul calității circRNA | Concentrare/purificare | Spectrofotometrie ultravioletă (UV). | 0.5 | Raport de testare |
Puritate | Electroforeză pe gel de agaroză (AGE)/E-gel | |||
HPLC-opțional | 1 |
Se pot realiza scenarii de aplicare.
circARN cu o puritate mai mare de 90%;
Prin controlul strict al RNazelor în mediul experimental și consumabile, degradarea ARN este prevenită în mod eficient.
Yaohai Bio-Pharma a stabilit o soluție matură de purificare a ARN-ului care poate elimina eficient diverse impurități legate de proces.
Produsele ARN circulare purificate prin soluția convențională sunt încă în mod evident amestecate cu ARN tăiat și introni.
După soluția de purificare dezvoltată de Yaohai Bio-Pharma, diferite impurități liniare de ARN, cum ar fi ARN-ul tăiat și intronii, pot fi îndepărtate cu succes.
Validarea expresiei circRNA
Folosind un lipozom convențional, ARN-ul eGFP purificat este transfectat în celule 293T și se observă un semnal de fluorescență după 24 de ore și continuă să fie îmbunătățit la 48 de ore. Semnalul de fluorescență poate fi încă detectat în a 7-a zi și a 14-a zi după transfecție.