În procesul de pregătire a transcripției in vitro (IVT) mRNA, este necesară DNA plasmid linearizată ca șablon pentru transcripția IVT cu ajutorul polimerazei RNA T7. O DNA plasmid de înaltă calitate este esențială pentru transcripția in vitro.
Pe baza platformei de servicii mature de pregătire a plasmidului, Yaohai Bio-Pharma poate oferi un serviciu de pregătire a DNA plasmid linearizat de o puritate și un standard înalt pentru a obține o transcripție IVT eficientă.
Detalii Servicii
| Procesul |
Serviciu Opțional |
Detalii ale Serviciului |
Perioadă de livrare (zi de lucru) |
| Prepararea Plasmidei Circulare |
Sinteza genetică |
Sinteză de Gene (Tertă) |
7-10 |
| Amplificare Plasmid |
Amplificare Plasmid |
2 |
| Extracție Plasmid |
| Prepararea Plasmidului Linearizat |
Liniarizare și purificare a plasmidei |
Liniarizarea plasmidului |
1 |
| Purificare ADN Linearizat |
| Controlul calității DNA-ului plasmidic |
Concentrație și puretate |
Spectrofotometrie Ultravioletă (UV) |
1-2 |
| Conformațiune plasmid |
Electroforeză în Gel de Agaroză (AGE) |
| Electroforesă Capilară (CE) - Opțional |
| Identificare a Plasmidului |
Identificare enzyme de restricție / AGE |
Caracteristicile noastre
Selecție flexibilă a metodelor de linearizare
- Rata ridicată de recuperare
Optimizarea metodelor de extracție și purificare a ADN-ului pentru a obține rate ridicate de recuperare.
- Controlul Calității Riguroase
Standarde stricte de control al procesului, cu o rată de conformațiune supereliculară a eșantironilor de plasmid destinați cercetării de peste 80%.
Servicii de pregătire și control calitativ al plasmidului la standarde ridicate și cu eficiență ridicată pentru a satisface nevoile experimentale.
Studiu de caz
Luând ca exemplu produsul mRNA_luciferase din catalogul Yaohai Bio-Pharma, plasmidul de templet pentru transcripție (grad de cercetare) are un raport superelicular de peste 90%, un raport de linearizare apropiat de 100% și un raport de transcripție ulterioară care ajunge la 1:200 (DNA plasmidic linearizat:mRNA).
MRNA_luciferase obținut prin pregătirea unui plasmid linearizat ca templet este transfecționat în celulele 243T, iar activitatea reacției enzim-substrat este evaluată la 24 de ore după transfecție.
Se poate detecta un semnal clar de activitate luciferază puternică, adică proteina luciferază este exprimată cu eficiență, sugerând că pureitatea templetului de transcripție poate să satisfacă complet cerințele pregătirii unei mRNA de înaltă calitate.
Testare a Raportului Plasmidului Superelicular
Validarea Expresiei mRNA Luciferaze In Vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
