Baza encapsulării este proiectarea și dezvoltarea sistemului de livrare. Un sistem de livrare bine conceput permite moleculelor circRNA să pătrundă în organism fără a fi degradate de enzymele RNA și apoi să fie livrate eficient la locația țintă, să treacă membranele celulare și să fie eliberate în interiorul celulei.
Particulele nano cu lipide (LNPs) reprezintă cel mai bun sistem de livrare disponibil, având avantaje în incapsulare, expresie in vivo și siguranță in vivo comparativ cu alte sisteme de livrare. LNPs cu fragmente de acid nucleic sunt ușor absorbate de către celule și formează corpuri intracelulare. Odată ce intra în celulă, mediul acid al corpului intracelular protonizează și încarcă pozitiv capul lipidului ionizat, fusionând astfel cu membrana internă a corpului intracelular și eliberând acidul nucleic țintă în celulă pentru a acționa.
Serviciul circRNA al Yaohai Bio-Pharma se continuă să se îmbunătățească și poate oferi serviciul de incapsulare circRNA-LNP pentru a optimiza parametrii critici ai procesului și a îmbunătăți consistența și reproductibilitatea producției medicamentelor circRNA.
Procesul | Detalii ale Serviciului | Perioadă de livrare (Zi) | Rezultate prezentabile |
encapsulare circRNA-LNP | Pretreatment al Materialului și Lichidului | 2 | produs farmaceutic circRNA-LNP (DP) |
Amestec cu Dispozitiv Microfluidic | |||
Filtrare prin Flux Tangențial | 1 | ||
Filtrare sterilizantă | |||
control calitativ circRNA-LNP | Eficiența de Encapsulare | 1 | Raport de testare |
Dimensiunea particulelor și indicele de polidispersie | |||
Potențial Zeta |
Sinteza rapidă, eficiență ridicată în cercetare și dezvoltare și soluții pre-optimizate;
Raportul de incapsulare poate ajunge peste 90%;
Mărimea nanoparticulelor lipidice poate fi controlată prin schimbarea ratei și raportului de injectare a lichidului;
produsele circRNA-LNP sunt validate prin expresie celulară in vitro și pot exprima proteinul țintă eficient.
Se pregătesc probe LNP-eGFP circRNA, iar diferite doze ale acestora (1ug, 2ug și 4ug) sunt transfectate direct în celulele 293T pentru a verifica dacă pot exprima proteinul țintă. După 48 de ore de transfecție, se poate observa un semnal fluorescent clar, existând un efect de escaladare a dozei intensității fluorescenței.
Lipo-circ_eGFP, format din liposomă și circRNA eGFP neincapsulată, este luat ca control.