Teste de Potență Bazădate pe Celule
Importanța Testului de Potență mRNA
Cu dezvoltarea rapidă a vaccinelor și terapiilor mRNA, este necesar un set specific de metode de analiză pentru a testa potența (definind activitatea lor biologică), care implică eficiența de traducere a mRNA. Aceste metode sunt, în mod tipic, bazate pe transfecția celulară și teste functionale ale proteinului țintă.
Yaohai Bio-Pharma oferă teste de potență bazate pe celule pentru substanțele medicamentoase mRNA sau produse LNP, inclusiv transfecție celulară (celule 293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7, etc.) și teste ELISA sau Western Blotting (WB).
Exigente Reglementare pentru Testele de Potență
Conform considerațiilor de reglementare ale OMS, „Puterea fiecărei serii a vaccinului final ar trebui să fie determinată folosind un metoda funcțională cuantitativă și validată potrivită. Testele de putere in vitro pot include sisteme de transfecție bazate pe celule sau teste fără celule.” Iar USP a recomandat un „test bazat pe celule” pentru a verifica puterea mRNA, adică expresia proteinului țintă.
Metodă Analitică
|
Analiză
|
Metode
|
|
Teste de Putere
|
Transfecție bazată pe celule și identificarea proteinului țintă:
celule 293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7, etc.
|
Procedură
Pasul 1. Transfecție bazată pe celule cu mRNA sau mRNA-LNP
Celulele sunt cultivare și transfectate cu mRNA sau mRNA-LNP. În detaliu, mRNA este transfectat după ce este mixat cu un reagent de transfecție, în timp ce mRNA-LNP este transfectat direct în celule. După 24-48 de ore, se clarifică supernatantul care conține proteina exprimată prin centrifugare.
Pasul 2. Teste Funcționale ale Proteinului Țintă
Realizați testele ELISA sau WB pentru a evalua legarea funcțională a proteinelor țintă.
Studiu de caz
Teste de Potență Bazate pe Celule ale Eșantillonilor mRNA
Yaohai-BioPharma a dezvoltat o metodă de testare a potenței bazată pe celule pentru mRNA, care include culturarea celulelor, transfecția celulară și teste funcționale de proteină. Am transfectat mRNA eGFP, mRNA mCherry, mRNA luciferază, mRNA proteică spike în celulele 293T și am detectat proteina țintă prin semnal fluorescent, luminescent sau colorat, WB, ELISA.
Teste de Potență Bazate pe Celule ale Produselor mRNA de către Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
