In het proces van in vitro transcriptie (IVT) mRNA wordt lineair plasmid-DNA vereist als de transcriptietemplate voor IVT met behulp van T7 RNA polymerase. Hoogwaardig plasmid-DNA is cruciaal voor in vitro transcriptie.
Op basis van het volledige plasmidvoorbereidingserviceplatform kan Yaohai Bio-Pharma een service bieden voor de bereiding van lineair plasmid-DNA van hoge zuiverheid en hoge standaard om efficiënte IVT-transcriptie te realiseren.
Service Details
| Proces |
Optionele Diensten |
Service Details |
Leveringsperiode (werkdag) |
| Circular Plasmid Bereiding |
Genesynthese |
Gene Synthese (Derdenpartij) |
7-10 |
| Plasmidvermenigvuldiging |
Plasmidvermenigvuldiging |
2 |
| Plasmidextractie |
| Linearisatie van plasmidpreparaten |
Plasmidlinearisatie en -purificatie |
Plasmidlineariseren |
1 |
| DNA-linearisatiezuivering |
| Plasmid DNA kwaliteitscontrole |
Concentratie zuiverheid |
Ultraviolet (UV) Spectrofotometrie |
1-2 |
| Plasmidconformatie |
Agarose Gel Electrophorese (AGE) |
| Capillaire Electrophorese (CE) - Optioneel |
| Plasmid identificeren |
Restrictie-enzymidentificatie\/AGE |
Onze functies
Flexibele selectie van linearisatiemethoden
Optimalisatie van DNA-extractie- en zuiveringsmethoden om hoge herstelraten te bereiken.
- Strenge kwaliteitscontrole
Streng procescontrolestandaard, met een supercoiled conformatieratio van plasmidmonsters voor onderzoek van meer dan 80%.
Hoge standaard en efficiënte plasmidbereiding- en kwaliteitscontroleservices om experimentele behoeften te voldoen.
Gevalstudie
Neem het mRNA_luciferase product uit de Yaohai Bio-Pharma catalogus als voorbeeld: het transscriptieplasmide monster (onderzoeksgraad) heeft een supercoïle verhouding van meer dan 90%, een linearisatieverhouding dicht bij 100% en een volgende transscriptieverhouding tot 1:200 (lineariseerd plasmid DNA:mRNA).
Het mRNA_luciferase dat wordt verkregen door het bereiden van een lineariseerd plasmid als sjabloon, wordt getransfereerd in 239T-cellen, en de enzym-substraatreactieactiviteit wordt 24 uur na transfectie geëvalueerd.
Er kan een duidelijk sterke luciferase activiteitsignaal worden gedetecteerd, wat betekent dat het luciferase-eiwit efficiënt wordt uitgedrukt, wat suggereert dat de pureheid van het transscriptiesjabloon volledig voldoet aan de eisen voor de voorbereiding van hoge-kwaliteits mRNA.
Assay voor de verhouding van Supercoïle Plasmiden
Validatie van de expressie van luciferase mRNA In Vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
