Penentuan Berat Molekul dengan LC-MS
Berat molekul yang utuh selalu diakui sebagai karakteristik penting dalam biologi. Analisis berat molekul utuh digunakan untuk menunjukkan produk protein/peptida dan memverifikasi sifat biologisnya. Mengukur berat molekul merupakan persyaratan pedoman peraturan.
Yaohai Bio-Pharma menawarkan analisis berat molekul utuh dalam kondisi N-deglikosilasi asli, tereduksi. Kami menggunakan Kromatografi Cair-Spektrometri Massa (LC-MS) untuk menentukan berat molekul utuh.
Persyaratan Peraturan untuk Berat Molekul
Direkomendasikan dalam ICH Q6 bahwa “berat (atau ukuran) molekul ditentukan menggunakan kromatografi eksklusi ukuran, elektroforesis gel SDS-poliakrilamida (dalam kondisi reduksi dan non-reduksi), spektrometri massa (MS), dan teknik lain yang sesuai”.
Metode analitis
| Analisis |
metode |
| Berat molekul |
LC-MS / Kromatografi Cair/Spektrometri Massa Elektrospray (LC/ES-MS) dari protein atau subunit N-deglikosilasi asli, tereduksi |
Prosedur Analitis
Berat Molekul Utuh:
- Melakukan LC-MS pada sampel asli seperti yang diterima.
- Analisis Data LC-MS.
Mengurangi Berat Molekul:
- Mengolah sampel protein dengan zat pereduksi yang sesuai;
- Melakukan LC-MS pada protein tereduksi;
- Analisis Data LC-MS.
Berat Molekul N-deglikosilasi:
- Menghapus N-glikan dengan enzim yang sesuai;
- Melakukan LC-MS pada protein N-deglikosilasi;
- Analisis Data LC-MS.
Berat Molekul Tereduksi dan N-deglikosilasi:
- Mengolah sampel protein dengan zat pereduksi yang sesuai;
- Menghapus N-glikan dengan enzim yang sesuai;
- Melakukan LC -MS pada protein tereduksi dan N-deglikosilasi;
- Analisis Data LC-MS.
Berat Molekul Subunit Protein:
- Pembelahan Subunit
- Melakukan LC-MS pada Subunit Protein
- Analisis Data LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
