Pembuatan profil N-glikan sangat penting untuk produksi biofarmasi. Yaohai Bio-Pharma menyediakan layanan pembuatan profil N-glikan menggunakan Kromatografi Cair-Spektrometri Massa (LC-MS) dari glikan yang dilepaskan dan diberi label. Langkah umum untuk menyiapkan sampel N-glikan meliputi pencernaan glikoprotein (GP), de-glikosilasi, pemurnian, pelabelan/derivatisasi, dan Ekstraksi Fase Padat (SPE).
Kami telah terlibat dalam Karakterisasi Struktural Protein dari berbagai molekul besar, termasuk Vaksin Subunit Rekombinan, Nanobodi/VHHs/ Antibodi Domain Tunggal (sdAbs), Fragmen Antibodi, Hormon/Peptida, Sitokin, Faktor Pertumbuhan (GF), Enzim, Kolagen, dll.
Persyaratan Peraturan untuk Pembuatan Profil N-Glycan
Menurut pedoman ICH Q6B, “untuk glikoprotein, kandungan karbohidrat (gula netral, gula amino, dan asam sialat) ditentukan. Selain itu, struktur rantai karbohidrat, pola oligosakarida (profil antena), dan lokasi glikosilasi rantai polipeptida dianalisis semaksimal mungkin.
Metode Analisis
| Analisis |
metode |
| Profil N-glikan |
Analisis Kromatografi Cair-Spektrometri Massa (LC-MS) dari glikan yang dilepaskan dan diberi label |
Prosedur
1. Pelepasan glikan enzimatik dengan Peptida N-Glikosidase F (PNGase F)
2. Derivatisasi glikan yang dilepaskan oleh 2-aminobenzamide (2-AB)
3. Pemurnian N-glikan yang dipanen pada kolom TSK Amida - 80 jika terdapat deterjen, garam nonvolatil, atau bahan dengan gugus amino bebas dalam jumlah besar
4. Pelabelan dengan fluoresen 2-aminobenzamide (2-AB)
5. Analisis LC-MS terhadap N-glikans berlabel
6. Analisis data
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
