Deamidasi rantai samping glutamin dan asparagin adalah modifikasi umum dalam hal dampak pada sifat biofarmasi protein. Deamidasi dapat terjadi pada residu glutamin, namun biasanya pada tingkat yang jauh lebih rendah. Laju deamidasi dipengaruhi oleh suhu, pH, struktur protein lokal, dan residu aminoasil yang mengapit.
Yaohai BioPharma menawarkan layanan pengujian deamidasi asam amino, yang memungkinkan Anda mendeteksi deamidasi asam amino dengan Kromatografi Cair-Spektrometri Massa (LC-MS).
Kami telah terlibat dalam Karakterisasi Struktur Protein berbagai molekul besar, termasuk Vaksin Subunit Rekombinan, Nanobodi/VHHs/ Antibodi Domain Tunggal (sdAbs), Fragmen Antibodi, Hormon/Peptida, Sitokin, Faktor Pertumbuhan (CF), Enzim, Kolagen, dll.
Persyaratan Peraturan untuk Deamidasi Asam Amino
Menurut pedoman ICH Q6B, bentuk deamidasi dapat dideteksi dan dikarakterisasi dengan metode kromatografi, elektroforesis dan/atau metode analisis lain yang relevan.
Metode analitis
| Analisis |
metode |
| Deamidasi |
Kromatografi Cair-Spektrometri Massa (LC-MS) |
Prosedur
misalnya, deamidasi aspartik
1. Pencernaan enzimatik
2. LC-MS dalam kondisi Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC).
3. Analisis data
Deamidasi asparagin terjadi melalui zat antara suksinimida (Suc), yang rentan terhadap rasemisasi dan hidrolisis, menghasilkan empat isomer Asp, termasuk L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp, dan D-IsoAsp.
Secara teori, deamidasi Gln dapat menghasilkan empat isomer Glu yang sesuai melalui proses yang mirip dengan deamidasi Asn.
Spektrometri massa resolusi tinggi dengan mudah mengidentifikasi perbedaan massa 1-Da antara peptida yang mengandung Asn/Gln dan rekan-rekannya yang terdeamidasi, Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
