Signifikansi Pemilihan Strain
Memilih host yang sesuai diperlukan untuk pengembangan CMC biologis, yang menentukan kualitas dan konsistensi produk serta proses manufaktur. Tujuan langsung dari seleksi host adalah untuk memberikan bank sel primer kandidat (PCB) dengan tingkat ekspresi tinggi dan stabilitas tinggi baik dalam hal stabilitas passage maupun stabilitas penyimpanan. Seleksi host yang sesuai diperlukan karena dua alasan utama:
- Pertama, untuk memilih mikroba host dengan tingkat ekspresi tinggi. Ada banyak strain komersial yang digunakan untuk mengekspresikan berbagai jenis protein, seperti protein toksin, protein larut, atau protein eukariotik.
- Kedua, untuk menyaring inang dengan stabilitas genetik. Pengujian stabilitas genetik adalah poin kunci sepanjang siklus hidup produksi. Disarankan bahwa stabilitas genetik tinggi diakui sebagai karakteristik kunci lainnya untuk strain yang cocok.
Kata kunci: seleksi strain mikroba, penyaringan strain mikroba, penyaringan berbasis high-throughput bakteri atau ragi, penyaringan strain penghasil tinggi, penyaringan strain stabil tinggi, penyaringan strain stabil genetik Aplikasi: obat manusia, obat hewan, vaksin, biologi sintetis, biologis molekul besar rekombinan, reagen biologis
Layanan Penyaringan Strain Yaohai Bio-Pharma
Dengan memanfaatkan lebih dari 10 tahun pengalaman CDMO dalam biologis mikroba, kami mendukung pengembangan dan manufaktur berbagai molekul besar, termasuk vaksin subunit rekombinan, partikel mirip virus (VLP), hormon (insulin, GLP-1, hormon pertumbuhan), sitokin (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), faktor pertumbuhan (EGF, FGF, NGF), nanobodies/Single-domain antibodies (sdAbs), enzim, dll.
Kami telah mengumpulkan pengalaman yang kaya dalam pemilihan berbagai jenis vektor plasmid dan inang mikroba, termasuk Bakteri Escherichia coli (E. coli), dan ragi Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Kami dapat menemukan sistem ekspresi terbaik untuk biologis unik Anda.
Kami mengumpulkan berbagai inang mikroba dengan sumber yang jelas dan CoA standar, termasuk E.Coli ekspresi bakteri dan ekspresi ragi.
Detail Layanan
Layanan
|
Detail Layanan
|
Jadwal minimum/hari
|
Hasil Pekerjaan
|
Pembangunan Strain (E. coli)
|
Transformasi plasmid (multi-tuan rumah)
|
5
|
COA dari host komersial Laporan pembangunan strain
|
Verifikasi PCR
|
Pemurnian strain
|
Pengawetan strain
|
Konstruksi Strain (Ragi)
|
Persiapan sel ragi kompeten
|
10
|
Linearisasi plasmid
|
Elektro transformasi
|
Skaring resistensi/kurang gizi
|
Pemurnian strain
|
Pengawetan strain
|
Penyaringan inang yang sesuai
|
Ekstraksi DNA plasmid atau genom
|
15-20
|
Proses penyaringan inang COA dari strain rekayasa
|
Verifikasi PCR, pencernaan enzim pembatas
|
Pemetaan Gen Target
|
Penyaringan inang dengan ekspresi tinggi
|
Penyaringan inang dengan stabilitas genetik
|
Pengawetan strain
|
Studi Kasus
Inang yang sesuai meningkatkan tingkat ekspresi protein sebesar 2,5 kali.
Kami ditugaskan untuk mengembangkan produksi tinggi E. coli ketegangan. Dan kami mencoba tiga jenis iklan E. coli inang, berdasarkan karakteristik protein target. Telah ditunjukkan bahwa strain S1-1 dan S1-2 (Gambar A: Lane 1,2) meningkatkan kadar protein hingga 3,5 kali dari strain awal klien (Gambar A: Lane 3).
Selain itu, strain S1-1 menunjukkan stabilitas genetik yang tinggi (Gambar B), dan diakui sebagai strain kandidat untuk perbankan sel primer (PCB).

Fitur Layanan Kami
Kemampuan yang terbukti dengan berbagai inang mikroba, misalnya, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae dan H. polymorpha .
Kami memiliki pengalaman dengan E. coli sekresi periplasmik, ekspresi larut dan tubuh inklusi, serta ekspresi intraseluler atau sekresi pada ragi. Kami tidak menambahkan antibiotik atau menambahkannya sesuai panduan regulasi.
Kami mendirikan platform penyaringan tinggi untuk menyaring strain dengan produksi tinggi dan stabil dari lebih dari seratus strain kandidat.
Dijamin bahwa proses rekayasa strain dan penyaringan dapat dilacak, sesuai dengan Manajemen Data dan Catatan yang Baik.