Rekombináns Fehérjeprodukció: Módosított E. coli Típusok

Az Escherichia coli (E. coli) jelentős szerepet játszott a biogázdasági iparban a rekombináns fehérjék gyártásában, mivel az első kifejezési vektor lett a biológiai gyógyszerek előállításához. Az E. coli gyors növekedést, egyszerű genetikai manipulációt és gyors rekombináns fehérjék szintézisét mutatja között más előnyökkel. Terjedelmes módosítások tesztelték az E. coli-t optimális választéknak a fehérjék kifejezéséhez, ami vezetett különböző módosított E. coli strandok tervezéséhez.

A Yaohai Bio-Pharma specializálódott egyetlen forrásból származó külső szolgáltatószolgáltatásokra az E. coli kifejezési rendszerek használatával a biogázdasági termékek fagytan, tisztítás, képzés folyamatfejlesztése és termelése során. A Yaohai bőséges tapasztalata tekintetében összegyük, hogy négy gyakori E. coli strand található a rekombináns fehérjék gyártásához és jellemzőik.

BL 21 strand

Az E. coli B liniazból származó BL21 strand hiányzik a Lon proteáz és az OmpT külső membrán-proteáz. A Lon proteáz főként exogén fehérgeket degrádál, míg az OmpT elsősorban az extracelluláris mátrix fehérgeit rombolja le. Ezek két kulcsproteáz hiánya hatékonyan megakadályozza a rekombináns fehérgek degrádációját.

Origami strand

Az Origami strand, amely az E. coli K-12 fajtából származik, mutációkat tartalmaz a tiorédoxin-reduktaş és a glutation-reduktaş genekben, amelyek segítenek a helyesen meghajlított, disszulfid-szálas fehérgek formálódásában és növelik a fehérgek oldhatóságát. Az Origami strand, beleértve az Origami, Origami 2 és az Origami B változatokat, alkalmas aktív, disszulfid-szálas fehérgek kifejezésére.

SHuffle strand

A SHuffle fajta konstitutívan kifejezi a DsbC disszulfoszkötvényi izomerázatot a citoplaszmban, ami elősegíti a helyes disszulfoszkötvények képzését az oksidált fehérjéken. Szintén szolgál molekuláris chaperonként a fehérjefejlesztés során, segítve a helyes konformáció formálásában.

Rosetta fajta

A Rosetta fajta kiegészíti az E. coli-t azokhoz a ritkaságú kodonokhoz tartozó tRNA-kal, amelyek célja az exogén gének, különösen a rezus-gének kifejezésének javítása a procariotikus rendszerekben. A BL21-ből származik és viszi a chloramfenikol ellenállóságú pRARE plasztidet, amely hat tRNA-t kiegészít az eredetileg az E. coli-ban hiányzó ritkaságú kodonokhoz (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC és GGA), így egy jobb "univerzális" fehérjekifejezést biztosít.

Következtetés

A sikeres rekombinánszélszeres termelés három fő tényezője a gazdas, a vektor és a kultúrási feltételek. A rekombinánszélszer fizikai-kémiai tulajdonságainak megértésének alapján, minden egyes ágens egyedi előnyeinek és a kísérlet konkrét igényeinek figyelembevételével válasszuk ki a legmegfelelőbb gazdát. Emellett a plazmidvektorok, a hőmérséklet és az inducerzők optimalizálása is fontos a szélszer-kifejezés növeléséhez.

A Yaohai Bio-Pharma aktívan keresi az intézményi vagy egyéni globális partnereket, és a gazdaságban legversenyképesebb bérkeltetést ajánlja. Ha bármilyen kérdés merül fel, kérjük, látogasson el hozzánk: [email protected]