mCherry mRNA ilmaisee fluoresoiva proteiini, mCherry, alun perin johdettu DsRed, proteiini, joka löytyy Discosoma sp. mCherry-proteiinissa on monomeerinen fluorofori, kun se altistetaan valolle ja jonka päästöhuippu on 610 nm. Tätä mRNA:ta käytetään yleisesti positiivisena kontrollina (reportterimarkkerina) mRNA-transfektiossa ja jakelujärjestelmän kehittämisessä.
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa muuntamattomana tai N1Ψ-muokattuna mCherry mRNA, jolla on Cap1-rakenne, optimoidut kodonit, muokattu UTR ja 110nt polyA -häntä mRNA:n stabiilisuuden ja translaation tehokkuuden parantamiseksi.
Tuotteet
mCherryn mRNA, Cap1, poly(A)-häntä, modifioimaton tai modifioitu mRNA
tuotteen yksityiskohdat
| Tuotteet |
mCherry mRNA |
| Kissa. Ei |
mP002 |
| RNA-sisältö |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Puhtaus |
A260 / A280 |
| Tunnista ja Puhtaus |
Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) |
| 5' Cap |
Cap1 |
| 3' poly(A) häntä |
110±5 nt |
| Perusmuutos |
Muutamaton, N1Ψ |
| puskuri |
RNaasi-vapaa vesi (neste) |
| Lähetys |
Laiva kuivajäällä; tai ympäristön lämpötilan alapuolella |
| varastointi |
Neste, -20 °C tai alle; Lyofilisoitu jauhe, 4°C |
| Hakemus |
Reportterigeenit, positiivinen kontrolli |
Muut mukautettavat vaihtoehdot
| 5' Cap |
● rajaamattomasta
● Cap0, co-capped
● Cap1, co-capped
● Cap1, entsymaattinen rajoitus
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Luonnon UTR-sekvenssi
● Mutantti/Engineered UTR-sekvenssi
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A Tail (suositus)
● Segmentoitu polyA-häntä
● Muu mukautettu häntä
|
| Modifioidut nukleosidit |
● Muokkaamattomat emäkset,
● pseudouridiini (Ψ),
● N1-metyyliseudouridiini (N1Ψ),
● 5-metyylisytosiini (m5C),
● 5-metyyliuridiini (m5U),
● 5-metoksiuridiini (5 mU),
● 2-tiouridiini (s2U),
● 2'-O-metyyli-U
● Muuta
|
mRNA:n valmistus ja solujen ilmentäminen
Linearisoidun plasmidi-DNA:n (pDNA) ottaminen mCherry mRNA koodaamalla geenejä IVT-templaattina, saimme puhdasta mCherryn mRNA-transkriptit yhteistranskription peittämisellä ja puhdistuksella cap1-rakenteella ja N1Ψ-modifikaatiolla. Puhdas mCherry-mRNA (1 µg) sekoitettuna kaupallisen transfektioreagenssin kanssa transfektoitiin 293T-soluihin 96-kuoppaisella levyllä. Ja fluoresenssikuvaus suoritettiin 24 tunnin kuluttua.
mCherryn mRNA:n ilmentyminen 293T-soluissa
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
