mCherry mRNA ekspressoi fluoresoivaa proteiinia, mCherryä, joka on alun perin johdettu DsRedistä, joka on Discosoma sp. mCherry-proteiinissa on monomeerinen fluorofori, kun se altistetaan valolle, ja jonka päästöhuippu on 610 nm. Tätä mRNA:ta käytetään yleisesti positiivisena kontrollina transfektiossa ja kuljetusjärjestelmän kehittämisessä.
eGFP mRNA ilmentää tehostettua vihreää fluoresoivaa proteiinia (eGFP), joka on alun perin johdettu meduusasta, Aequorea victoriasta. eGFP-proteiini näyttää kirkkaan vihreää fluoresenssia, kun se altistetaan valolle välillä sinisestä ultraviolettiin, ja päästöhuippu on 509 nm. eGFP-mRNA:ta käytetään yleisesti positiivisena kontrollina transfektio- ja toimitusjärjestelmän kehittämisessä.
mCherry-eGFP mRNA ilmaisee molempia yhdessä mCherry ja eGFP.
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa muuntamattomana tai N1Ψ-muokattuna mCherry-eGFP mRNA, jolla on Cap1-rakenne, optimoidut kodonit, muokattu UTR ja 110nt polyA -häntä mRNA:n stabiilisuuden ja translaation tehokkuuden parantamiseksi.
Tuotteet
mCherry-eGFP mRNA, Cap1, poly(A) häntä, modifioimaton tai modifioitu mRNA
tuotteen yksityiskohdat
Tuotteet |
mCherry-eGFP mRNA |
Kissa. Ei | mP004 |
RNA-sisältö | 100 µg ~ 10 mg (OD260) |
Puhtaus | A260 / A280 |
Tunnista ja Puhtaus | Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) |
5' Cap | Cap1 |
3' poly(A) häntä | 110±5 nt |
Perusmuutos | Muutamaton, N1Ψ |
puskuri | RNaasivapaa vesi (neste) |
Lähetys | Laiva kuivajäällä; tai ympäristön lämpötilan alapuolella |
varastointi |
Neste, -20 °C tai alle; Lyofilisoitu jauhe, 4°C |
Hakemus | Reportterigeenit, positiivinen kontrolli |
Muut mukautettavat vaihtoehdot
5' Cap |
● rajaamattomasta ● Cap0, co-capped ● Cap1, co-capped ● Cap1, entsymaattinen rajoitus |
5' UTR/3' UTR |
● Luonnon UTR-sekvenssi ● Mutantti/Engineered UTR-sekvenssi |
3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A Tail (suositus) ● Segmentoitu polyA-häntä ● Muu mukautettu häntä |
Modifioidut nukleosidit |
● Muokkaamattomat emäkset, ● pseudouridiini (Ψ), ● N1-metyyliseudouridiini (N1Ψ), ● 5-metyylisytosiini (m5C), ● 5-metyyliuridiini (m5U), ● 5-metoksiuridiini (5 mU), ● 2-tiouridiini (s2U), ● 2'-O-metyyli-U ● Muuta |
mRNA:n valmistus ja solujen ilmentäminen
Linearisoidun plasmidi-DNA:n (pDNA) ottaminen mCherry-eGFP mRNA koodaamalla geenejä IVT-templaattina, saimme puhtaat mCherry-eGFP mRNA-transkriptit yhteistranskription kappauksella ja puhdistuksella cap1-rakenteella ja N1Ψ-modifikaatiolla.
Puhdas mCherry-eGFP-mRNA (1 µg) sekoitettuna kaupalliseen transfektioreagenssiin transfektoitiin 293T-soluihin 96-kuoppaisella levyllä. Ja fluoresenssikuvaus suoritettiin 48 tunnin kuluttua.
mCherry-eGFP mRNA:n ilmentyminen 293T-soluissa