eGFP mRNA ilmentää tehostettua vihreää fluoresoivaa proteiinia (eGFP), joka on alun perin johdettu meduusasta, Aequorea victoriasta. eGFP näyttää kirkkaan vihreää fluoresenssia, kun se altistetaan valolle välillä sininen ja ultravioletti, ja päästöhuippu on 509 nm. eGFP-mRNA:ta käytetään yleisesti reportterimarkkerina (positiivisena kontrollina) transfektio- ja toimitusjärjestelmän kehittämisessä.
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa modifioimatonta tai N1Ψ-modifioitua eGFP-mRNA:ta, jossa on Cap1-rakenne, optimoidut kodonit, muokattu UTR ja 110nt poly(A)-häntä mRNA:n stabiilisuuden ja translaation tehokkuuden parantamiseksi.
eGFP mRNA, Cap1, poly(A) häntä, modifioimaton tai modifioitu mRNA
tuotteen yksityiskohdat
Tuotteet | eGFP mRNA |
Kissa. Ei | mP001 |
RNA-sisältö | 100 µg ~ 10 mg (OD260) |
Puhtaus | A260 / A280 |
Tunnista ja Puhtaus | Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) |
5' Cap | Cap1 |
3' poly(A) häntä | 110±5 nt |
Perusmuutos | Muutamaton, N1Ψ |
puskuri | RNaasi-vapaa vesi (neste) |
Lähetys | Laiva kuivajäällä; tai ympäristön lämpötilan alapuolella |
varastointi | Neste, -20 °C tai alle; Lyofilisoitu jauhe, 4°C |
Hakemus | Reportterigeenit, positiivinen kontrolli |
5' Cap |
● rajaamattomasta ● Cap0, co-capped ● Cap1, co-capped ● Cap1, entsymaattinen rajoitus |
5' UTR/3' UTR |
● Luonnon UTR-sekvenssi ● Mutantti/Engineered UTR-sekvenssi |
3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A Tail (suositus) ● Segmentoitu polyA-häntä ● Muu mukautettu häntä |
Modifioidut nukleosidit |
● Muokkaamattomat emäkset, ● pseudouridiini (Ψ), ● N1-metyyliseudouridiini (N1Ψ), ● 5-metyylisytosiini (m5C), ● 5-metyyliuridiini (m5U), ● 5-metoksiuridiini (5 mU), ● 2-tiouridiini (s2U), ● 2'-O-metyyli-U ● Muuta |
Linearisoidun plasmidi-DNA:n (pDNA) ottaminen eGFP mRNA koodaamalla geenejä IVT-templaattina, saimme puhtaat eGFP-mRNA-transkriptit yhteistranskription kappauksella ja puhdistuksella cap1-rakenteella ja N1Ψ-modifikaatiolla.
Puhdas eGFP-mRNA (1 μg) sekoitettuna kaupalliseen transfektioreagenssiin transfektoitiin 293T-soluihin 96-kuoppaisella levyllä. Ja fluoresenssikuvaus suoritettiin 24 tunnin kuluttua.