Firefly lusiferaasi (F-Luc) mRNA ilmentää lusiferaasiproteiinia, joka on alun perin eristetty tulikärpäsestä Photinus pyralis. Tämä proteiini emittoi bioluminesenssia substraatin, lusiferiinin, läsnä ollessa.
Tulikärpäsen lusiferaasi-mRNA:ta käytetään yleisesti positiivisena kontrollina mRNA-transfektiossa ja jakelujärjestelmän kehittämisessä. Tulikärpäsen lusiferaasia voidaan käyttää myös nisäkässoluviljelmässä mittaamaan sekä geeniekspressiota että solujen elinkelpoisuutta.
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa muuntamattomana tai N1Ψ-muokattuna Firefly lusiferaasi-mRNA, jolla on Cap1-rakenne, optimoidut kodonit, muokattu UTR ja 110nt polyA -häntä mRNA:n stabiilisuuden ja translaation tehokkuuden parantamiseksi.
Tuotteet
Firefly-lusiferaasi-mRNA, Cap1, poly(A)-häntä, modifioimaton tai modifioitu mRNA
tuotteen yksityiskohdat
| Tuotteet |
Firefly lusiferaasi-mRNA |
| Kissa. Ei |
mP003 |
| RNA-sisältö |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Puhtaus |
A260 / A280 |
| Tunnista ja Puhtaus |
Agaroosigeelielektroforeesi (AGE) |
| 5' Cap |
Cap1 |
| 3' poly(A) häntä |
110±5 nt |
| Perusmuutos |
Muutamaton, N1Ψ |
| puskuri |
RNaasi-vapaa vesi (neste) |
| Lähetys |
Laiva kuivajäällä; tai ympäristön lämpötilan alapuolella |
| varastointi |
Neste, -20 °C tai alle; Lyofilisoitu jauhe, 4°C |
| Hakemus |
Reportterigeenit, positiivinen kontrolli |
Muut mukautettavat vaihtoehdot
| 5' Cap |
● rajaamattomasta
● Cap0, co-capped
● Cap1, co-capped
● Cap1, entsymaattinen rajoitus
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Luonnon UTR-sekvenssi
● Mutantti/Engineered UTR-sekvenssi
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A Tail (suositus)
● Segmentoitu polyA-häntä
● Muu mukautettu häntä
|
| Modifioidut nukleosidit |
● Muokkaamattomat emäkset,
● pseudouridiini (Ψ),
● N1-metyyliseudouridiini (N1Ψ),
● 5-metyylisytosiini (m5C),
● 5-metyyliuridiini (m5U),
● 5-metoksiuridiini (5 mU),
● 2-tiouridiini (s2U),
● 2'-O-metyyli-U
● Muuta
|
mRNA:n valmistus ja solujen ilmentäminen
Linearisoidun plasmidi-DNA:n (pDNA) ottaminen F-Luc mRNA koodaamalla geenejä IVT-templaattina, saimme puhtaat F-Luc-mRNA-transkriptit yhteistranskription kappauksella ja puhdistuksella cap1-rakenteella ja N1Ψ-modifikaatiolla.
Puhdas F-Luc-mRNA (1 μg) sekoitettuna kaupalliseen transfektioreagenssiin transfektoitiin 293T-soluihin 96-kuoppaisella levyllä. Ja lusiferaasimääritys suoritettiin 24 tunnin kuluttua.
Firefly-lusiferaasi-mRNA:n ilmentyminen 293T-soluissa
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
