mRNA syntetisoidaan in vitro -transkriptiolla (IVT) linearisoidusta plasmidi-DNA:sta (pDNA). Joitakin sivutuotteita muodostuu myös IVT-toimenpiteen aikana, mukaan lukien kaksijuosteinen RNA (dsRNA), joka on tunnistettu tärkeimmäksi synnynnäisen immuunipolun laukaisemiseksi. On tärkeää poistaa epäpuhtaudet ja saada korkea saanto puhdasta mRNA:ta in vitro/vivo mRNA-tutkimukseen ja terapeuttisiin sovelluksiin.
Yaohai Bio-Pharma on perustanut joukon mRNA-synteesitekniikoita tarjotakseen erittäin puhdasta mRNA:ta, kuten sekvenssisuunnittelu ja optimointi, IVT, puhdistus, lyofilisointi ja lipidinanohiukkasten (LNP) kapselointi. Kaikki tuotteet julkaistaan tiukkojen laadunvalvontastandardien mukaisesti. Affiniteettikromatografia (AC), joka perustuu vahvaan ja selektiiviseen vuorovaikutukseen mRNA:n 3'-polyA-hännän ja stationaarifaasin oligo-dT:n välillä, on tehokas ja skaalautuva mRNA:n puhdistusstrategia.
Tuotokset
| Tuotteet |
Räätälöity erittäin puhdas mRNA
|
| Pituus |
100-10,000 XNUMX nukleotidia |
| RNA-sisältö |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Puhtaus |
A260 / A280 |
| Tunnista ja Puhtaus |
Agaroosigeelielektroforeesi (AGE)
Kapillaarielektroforeesi (CE)
|
| puskuri |
RNaasivapaa vesi (neste) |
| Lähetys |
Laiva kuivajäällä; tai ympäristön lämpötilan alapuolella |
| varastointi |
● Neste, -20°C tai alle
● Lyofilisoitu jauhe, 4°C
|
| Hakemus |
LNP-formulaation kehittäminen,
Solupohjaiset määritykset, eläinkoe
|
Muut mukautettavat vaihtoehdot
| 5' Cap |
● rajaamattomasta
● Cap0, co-capped
● Cap1, co-capped
● Cap1, entsymaattinen rajoitus
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Luonnon UTR-sekvenssi
● Mutantti/Engineered UTR-sekvenssi
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A Tail (suositus)
● Segmentoitu polyA-häntä
● Muu mukautettu häntä
|
| Modifioidut nukleosidit |
● Muokkaamattomat emäkset,
● pseudouridiini (Ψ),
● N1-metyyliseudouridiini (N1Ψ),
● 5-metyylisytosiini (m5C),
● 5-metyyliuridiini (m5U),
● 5-metoksiuridiini (5 mU),
● 2-tiouridiini (s2U),
● 2'-O-metyyli-U
● Muuta
|
Tapaustutkimus
Kehitimme monivaiheisen kromatografian puhdistusprosessin ja valmistimme mRNA:ta, jolla oli korkea puhtaus ja eheys (> 95 %).
Kuva. Korkean puhtauden (＞98 %) mRNA:n analyysi
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
