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Síntesis de circRNA altamente pura

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ARN circulares (circRNA) son una clase de ARN monocatenario cerrado covalentemente sin extremos 5' o 3'. Esta característica única puede prevenir la degradación del circRNA por exonucleasas y potenciar el circRNA con alta estabilidad y eficiencia de traducción en relación con el mRNA lineal.

El circRNA se sintetiza mediante circulación in vitro a partir de un precursor de ARN lineal. Las impurezas relacionadas con el proceso o el producto pueden provocar una respuesta inmune innata, especialmente los ARN lineales (precursores de ARN, ARN mellados, intrones extirpados). Es fundamental eliminar las impurezas del ARN lineal y obtener altos rendimientos de ARNcirc puro para aplicaciones terapéuticas e investigación in vitro/vivo.

Yaohai Bio-Pharma ha establecido un conjunto de tecnologías de síntesis de circRNA para proporcionar circRNA de alta pureza, que implican diseño y optimización de secuencias, transcripción in vitro (IVT), circularización/ciclización, purificación por cromatografía líquida preparativa de alto rendimiento (HPLC) y nanopartículas lipídicas ( LNP) encapsulación. Todos los productos se lanzan bajo estrictos estándares de control de calidad (QC).

Lo que recibe el cliente

Producto CirRNA personalizado de alta pureza
Método de síntesis Autoempalme del intrón del grupo I
Contenido de ARN 100 µg~10 mg (DO260)
Longitud Mínima 50~8,000 nucleótidos
Pureza A260 / A280
Identificar y Pureza Electroforesis en gel de agarosa (AGE), cromatografía de lípidos de alta resolución (HPLC)
Buffer Agua libre de RNasa (líquida)
Envío Enviar con hielo seco; o bajo temperatura ambiente
Storage Líquido, a -20°C o menos; Polvo liofilizado, a 4°C
Application Desarrollo de formulación de LNP, ensayos basados ​​en células, experimento con animales.

Casos prácticos

Desarrollamos un proceso de purificación escalable utilizando principalmente HPLC preparativa y preparamos circRNA con alta pureza (>95%).

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Fig. Purificación y análisis de circRNA con alta pureza (98%)

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