Explora el Fascinante Mundo de la Precipitación de Cloruro de Litio

La precipitación de cloruro de litio se utiliza ampliamente para separar ARN de una solución.

Aquí está el desglose del proceso:

1. Preparación de la muestra: Comience con una muestra que contenga ARN, como in vitro mezcla de transcripción.

2. Adición de cloruro de litio: Agregue un volumen adecuado de solución concentrada de cloruro de litio a la solución de ARN.

3. Incubación: Después de agregar el cloruro de litio, la solución se incubará a baja temperatura, generalmente alrededor de -20°C. Esto provoca que las moléculas de ARN se precipiten fuera de la solución.

4. Centrifugación: Después de la incubación, la solución se centrifuga a alta velocidad. Esto separa el ARN precipitado del resto de la solución, que contiene impurezas.

5. Lavado: Una vez que se completa la centrifugación, retire cuidadosamente el sobrenadante sin interferir con la precipitación de ARN. Lave las partículas de ARN con etanol frío o alcohol isopropílico para eliminar cualquier impureza restante.

6. Reconstitución del ARN: Después de lavar, el precipitado de ARN se seca brevemente al aire y luego se reconstituye en un tampón adecuado, como el tampón TE (tampón Tris-EDTA) o agua destilada. Puede ser necesario realizar pipeteo suave o corrientes de vórtice para reconstituir adecuadamente el ARN.

7. Cuantificación y análisis: Finalmente, el ARN aislado se cuantifica mediante espectrofotometría ultravioleta o método de fluorescencia. Esto determina la concentración y pureza de la muestra de ARN, lo cual es importante para aplicaciones posteriores como la encapsulación LNP y la transfección celular.

Yaohai Bio-Pharma tiene experiencia en el uso del método de precipitación con cloruro de litio en el proceso de producción porque es simple, de bajo costo y produce ARN de alta calidad adecuado para una variedad de aplicaciones en biología molecular. Sin embargo, es importante optimizar las condiciones (por ejemplo, concentración de cloruro de litio, tiempo de incubación, velocidad de centrifugación) para obtener los mejores resultados para una muestra específica.

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