Métodos de purificación de ARNm actualizados en 2024

La purificación, un paso crucial en la producción de ARNm, implica la eliminación de impurezas como productos químicos que no reaccionaron o materiales residuales.

El proceso de purificación garantiza la consistencia de lote a lote de las formulaciones de ARNm y nanopartículas lipídicas (LNP), eliminando los componentes inestables y mejorando así su biodisponibilidad y eficacia in vivo.

A continuación se muestran varios métodos de purificación comunes:

1. Precipitación de cloruro de litio:El ARN forma complejos con cloruro de litio y alcohol, precipitando, seguido de centrifugación para separar el precipitado de ARN para su purificación;

2. Purificación con perlas magnéticas: Las perlas magnéticas modificadas en la superficie se unen selectivamente al ARN, lo que permite una purificación rápida y eficiente a través del movimiento controlado con un campo magnético;

3. Cromatografía de afinidad: Utilizando la afinidad entre el ARNm poliA y el oligo dT para capturar el ARN y eliminar impurezas;

4. Cromatografía de intercambio iónico: Aprovechando las diferencias en las interacciones entre el ARN y los grupos de intercambio iónico, la separación y purificación del ARN se logra ajustando la fuerza de los iones y el pH en la columna de intercambio iónico.

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