Produkce monoclonálních antitěles v E. coli: Postupy a předpovědi

Monoklonální antitěla (mAbs), která jsou rozpustnými glykoproteiny o hmotnosti přibližně 150 kDa, se skládají z těžkých a lehkých řetězců a široce se používají při léčbě nádorů a autoimunních nemocí. V posledních letech se staly metody výroby mAbs a jejich derivátů různorodějšími, s Escherichia coli ( E. coli ) jako důležitým hostitelem pro produkci fragmentů antitěl.

Při výrobě mAbs vykazuje Yaohai Bio-Pharma bohaté zkušenosti z výzkumu a vývoje. S dospělou platformou, pokročilým vybavením a inovativní technologií plné ekologické expresie nabízí Yaohai kompletní služby od vytvoření bunkové banky po zakončení (fill&finish), úplně přizpůsobené potřebám klientů.

Metody výroby mAbs v E. coli

E. coli nabízí rychlý růst, nízké náklady, snadné zacházení a flexibilitu v expresi v cytoplazmě, periplazmatu nebo kultura médiu. V E. coli je produkce protilátek hlavně rozdělena do periplazmatické, cytoplazmatické a částečně oxidované cytoplazmatické produkce, stejně jako do bezbuněčných systémů syntézy bílkovin (CFPS). Periplazmatická produkce dosáhla vysokého výnosu funkčních plně délkových imunoglobulinů G (FL-IgG) prostřednictvím optimalizovaného rovnováhu mezi expresí a sekrecí. Cytoplazmatická produkce čelí výzvám kvůli redukujícímu prostředí, ale funkční FL-IgG byly úspěšně vyjádřeny inženýrstvím štras pro vytvoření oxidativního prostředí. CFPS systém dosáhl efektivní produkce protilátek přizpůsobením oblastí iniciace překladu a přidáním chaperonových bílkovin.

Charakterizace protilátek a kontrola kvality

Kontrola kvality antitěles zahrnuje biochemické, biofyzikální a biologické charakterizace. Biochemická charakterizace analyzuje strukturu antitěl, jejich sekvenci a glykosylaci mezi dalšími. Biofyzikální charakterizace posuzuje homogenitu, rozpustnost a stabilitu. Biologická charakterizace ověřuje bioaktivitu antitěl, včetně ADCC a CDC mezi dalšími. I když deglykosylovaná antitěla vyrobená v E. coli chybí určité Fc efektorové funkce, studie ukázaly, že jejich stabilita je podobná těm glykosylovaných antitěl a prokázaly podobnou terapeutickou účinnost za testovaných podmínek.

Pro obnovení nebo posílení imunologických účinků deglykosylovaných antitěl lze inženýrským způsobem upravit domény Fc. Například lze vybírat mutanty, které se vážou na FcɣRI, aby byla posílena ADCC efektorová funkce. Tyto inženýrsky upravená antitěla demonstrovají významné biologické účinky a terapeutický potenciál jak in vitro, tak in vivo.

Závěr

Shrnutím lze říct, že výroba odglykosylovaných antitěles v E. coli udělala důležitý pokrok v oblasti produkce antitěles, což snížilo náklady a zlepšilo kvalitu. I když chybí určité Fc efektorové funkce, pomocí inženýrského návrhu ukazují zdokonalené efektorové funkce a léčebný potenciál. Očekává se, že více odglykosylovaných antitěles vyrobených v E. coli vstoupí v budoucnu do klinických studií.

Hledáme také aktivně institucionální nebo individuální globální partnery. Nabízíme nejvyšší odměnu v odvětví. Pokud máte jakékoliv otázky, neváhejte nás kontaktovat na [email protected]