mRNA je syntetizována in vitro transkripcí (IVT) z linearizované plazmidové DNA (pDNA). Některé vedlejší produkty se také tvoří během IVT procedury, včetně dvouvláknové RNA (dsRNA), která je identifikována jako hlavní spouštěče pro vrozenou imunitní dráhu. Je důležité odstranit nečistoty a získat vysoké výtěžky čistá mRNA pro in vitro/vivo výzkum mRNA a terapeutické aplikace.
Společnost Yaohai Bio-Pharma vytvořila sadu technologií syntézy mRNA, které poskytuje vysoce čistá mRNA, jako je sekvenční návrh a optimalizace, IVT, purifikace, lyofilizace a zapouzdření lipidových nanočástic (LNP). Všechny produkty podléhají přísným standardům kontroly kvality. Afinitní chromatografie (AC), založená na silné a selektivní interakci mezi 3' polyA koncem mRNA s oligo dT ve stacionární fázi, je účinnou a škálovatelnou purifikační strategií pro mRNA.
Dodávky
Produkt |
Přizpůsobená vysoce čistá mRNA |
Délka | 100~10,000 nukleotidů |
Obsah RNA | 100 ug~10 mg (OD260) |
Čistota | A260 / A280 |
Identifikace a čistota |
Elektroforéza v agarózovém gelu (AGE) Kapilární elektroforéza (CE) |
Bufferu | Voda bez RNázy (kapalina) |
Přeprava | Loď se suchým ledem; nebo při okolní teplotě |
Skladování |
● Kapalina, při nebo pod -20 °C ● Lyofilizovaný prášek při 4 °C |
editaci videa |
vývoj formulace LNP, Buněčné testy, Experiment na zvířatech |
Další přizpůsobitelné možnosti
5' uzávěr |
● Bez omezení ● Cap0, co-capated ● Cap1, co-capated ● Cap1, enzymatické uzavření |
5' UTR/3' UTR |
● Přirozená sekvence UTR ● Mutantní/upravená sekvence UTR |
3' PolyA ocas |
● 100A ~120A ocas (doporučeno) ● Segmentovaný polyA ocas ● Další vlastní ocas |
Modifikované nukleosidy |
● Neupravené základny, ● Pseudouridin (Ψ), ● N1-methylpseudouridin (N1Ψ), ● 5-methylcytosin (m5C), ● 5-methyluridin (m5U), ● 5-methoxyuridin (5moU), ● 2-thiouridin (s2U), ● 2'-O-methyl-U ● jiní |
Případová studie
Vyvinuli jsme vícestupňový chromatografický purifikační proces a připravili mRNA s vysokou čistotou a integritou (>95 %).
Obr. Analýza mRNA s vysokou čistotou (>98 %)