mRNA je syntetizována in vitro transkripcí (IVT) z linearizované plazmidní DNA (pDNA). Během postupu IVT se také vytvářejí některé vedlejší produkty, včetně dvojitého RNA (dsRNA), která byla identifikována jako hlavní spouštěče imunitní cesty. Je kritické odstranit nepůvodky a získat vysoké výnosy čisté mRNA pro výzkum mRNA in vitro/vivo a terapeutické aplikace.
Yaohai Bio-Pharma vyvinula sadu technologií pro syntézu mRNA, která poskytuje mRNA vysoké čistoty , jako jsou návrh a optimalizace sekvence, IVT, čištění, lyofilizace a encapsulace do lipidových nanoparticel (LNP). Všechny produkty jsou uvolněny pod přísnými standardy kontroly kvality. Afinní chromatografie (AC), založená na silném a selektivním interakci mezi 3′ polyA ocasem mRNA s stacionárním fázovým oligo dT, je efektivní a škálovatelnou strategií pro čištění mRNA.
Dodávané výsledky
Produkt |
Vlastní mRNA vysoké čistoty |
Délka | 100~10 000 nukleotidů |
Obsah RNA | 100 µg~10 mg (OD260) |
Čistota | A260/A280 |
Identifikace a čistota |
Elektroforeze v agárovém geлу (AGE) Kapilární elektroforeze (CE) |
amortizační prvek | Voda volná od RNase (kapalná) |
Doprava | Doručovat se suchým ledem; nebo při místní teplotě |
Úložiště |
● Tekutina, v nebo pod -20°C ● Lyofilizovaný prášek, při 4°C |
Aplikace |
Vývoj formulace LNP, Bunkové asesy, Zkoušky na živitelích |
Ostatní přizpůsobitelné možnosti
5' Kap |
● Bez kapu ● Cap0, společně zakončené ● Cap1, společně zakončené ● Kap1, enzymatické uzavírání |
5' UTR/3' UTR |
● Přirozená sekvence UTR ● Mutantní/Strojená sekvence UTR |
3' PolyA ocas |
● 100A ~120A Ocas (doporučeno) ● Segmentovaný polyA ocas ● Jiný vlastní ocas |
Modifikované nukleosidy |
● Nemodifikované základy, ● Pseudouridin (Ψ), ● N1-Methylpseudouridin (N1Ψ), ● 5-methylcytosin (m5C), ● 5-methyluridin (m5U), ● 5-methoxyuridin (5moU), ● 2-thiouridin (s2U), ● 2′-O-methyl-U ● Ostatní |
Případová studie
Vyvinuli jsme vícestupňový proces chromatografické čistění a připravili mRNA s vysokou čistotou a integrity (>95 %).
Analýza mRNA s vysokou čistotou (>98 %)