Plasmied: 'n Klein sirkelvormige DNA-molekule met groot potensiaal

Plasmiede, klein sirkelvormige DNA-molekules, dien as noodsaaklike vektore vir DNA-rekombinasie in molekulêre biologie navorsing en geenterapie. Die opbrengs en kwaliteit van plasmiede is van kardinale belang, met supergedraaide proporsie en endotoksieninhoud wat twee beduidende faktore is wat plasmiedkwaliteit beïnvloed.

Plasmied subtipes

Plasmiede wat uit Escherichia coli (E. coli) onttrek is, bestaan ​​in verskeie subtipes: supergedraaide (SC), oop sirkelvormige (OC) en lineêre (L) vorms (Figuur 1). Onder hulle vertoon supergedraaide plasmiede uitstekende stabiliteit, antigenisiteit en hoë transfeksie- en uitdrukkingsdoeltreffendheid.

Figuur 1. Skematiese diagram van algemene plasmiedsubtipes

In agarosegel-elektroforese van plasmied-DNS is die volgorde van migrasiespoed supergedraaide DNA, lineêre DNA en oop sirkelvormige DNA (Figuur 2).

Figuur 2. Agarose Gel Elektroforese Migrasie Patroon van Verskillende Plasmied Subtipes

Yaohai Bio-Pharma het sy prosesse en tegnieke voortdurend verbeter om te verseker dat die supergedraaide proporsie van transfeksiegraad plasmiede ≥85% is en dié van navorsingsgraadplasmiede ≥50%. Die volgende is 'n gevaldemonstrasie (Figuur 3), waar agarosegelelektroforese gekombineer word met Gel-Pro Analyzer-sagteware om die supergedraaide proporsie op te spoor.

Figuur 3. Kwaliteit Inspeksie Resultate van Plasmied Supercoiled Proporsie

Endotoksien

Endotoksien, 'n komponent van die selwand van Gram-negatiewe bakterieë, bestaan ​​hoofsaaklik uit lipopolisakkaried A (LPS-A) as sy toksiese komponent. Tydens plasmiedekstraksie word endotoksien in die lisisoplossing vrygestel, wat die doeltreffendheid van plasmiedtransfeksie in selle ernstig beïnvloed. Daarbenewens kan dit nie-spesifieke immuunresponse in selle aktiveer, wat lei tot vals positiewe in eksperimente.

Yaohai Bio-Pharma volg 'n "nie-inleiding" en "hoë verwydering" benadering, wat die gebruik van reagense en materiale wat endotoksien bevat, deur die hele suiweringsproses streng beheer. Die maatskappy het ook 'n doeltreffende endotoksienverwyderingsmetode ontwikkel wat drie vlakke van endotoksieninhoud bied: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, en ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma beskik oor 'n hoë-deurset plasmied ekstraksie diens lyn, wat in staat is om 1 mg van onttrek plasmiede te lewer in so vinnig as een week. By verstek bied dit meer as sewe kwaliteitskontrole (QC) toetse om die lewering van hoë kwaliteit, hoë standaard plasmiede vanuit verskeie perspektiewe te verseker.

Ons is ook aktief op soek na institusionele of individuele globale vennote. Ons bied die mees mededingende vergoeding in die bedryf. As jy enige vrae het, voel asseblief vry om ons te kontak: [email protected]