Gehaltebeheer en toepassings van rekombinante proteïene

Gehaltebeheer van rekombinante proteïene is van kardinale belang vir die betroubaarheid en reproduseerbaarheid van eksperimentele data. Elke stap, van projekontwerp tot produksieproses, vereis streng gehaltebeheerstrategieë.

Gehaltebeheerstrategieë

Die nywerheidsektor voldoen aan streng standaardbedryfsprosedures, terwyl die akademiese gemeenskap professionele kennis moet verbeter om data-reproduceerbaarheid te verbeter. Proteïene met spesifieke biologiese toepassings of biochemiese kenmerke vereis pasgemaakte gehaltebeheer (QC) strategieë.

Uitdagende voorbeelde en oplossings

Yaohai Bio-Pharma spog met uitgebreide ervaring in rekombinante proteïenproduksie en suiwering, tesame met 'n span kundiges, wat verseker dat jou proteïenproduksie met hoë suiwerheid voltooi word. Met behulp van ons ervaring van honderde projekte, som Yaohai vriendelik op hoe om proteïensuiwering te optimaliseer.

Nukleïensuur-bindende proteïene: Nukleïensuurverwyderingstappe, soos nukleases of PEI-presipitasie, is nodig. Die A260nm/A280nm verhouding word gemonitor om nukleïensuur kontaminasie op te spoor.

Muis Ferritin Heavy Chain 1 vir cryo-EM: Suiweringstappe moet geoptimaliseer word, en nukleases moet bygevoeg word om die A260nm/A280nm verhouding te verminder en proteïensuiwerheid te verseker.

Chimeriese Proteïen Menslike dsRBEC: Sellisis gebruik `n buffer wat ureum bevat, gevolg deur op-kolom hervou om funksioneel aktiewe proteïene te verkry.

Proteïene wat tweewaardige katione bind: Spesifieke tweewaardige katione moet tydens ekspressie en suiwering bygevoeg word, en chelaatvormers moet vermy word.

Yster-swaelproteïene: Imidasool moet vermy word om ontwrigting van die [2Fe ± 2S]-kluster te voorkom, om die korrekte proteïenvou en funksie te verseker.

Oplosbare fragment van LLT1: Mutantontwerp optimaliseer disulfiedbindingsvorming en proteïenvou, wat lei tot stabiele en hoë-opbrengs proteïene.

CLK1 Kinase Kristallisasie: Ko-uitdrukking met λ-fosfatase verwyder fosfate van fosforileringsplekke, en grootte-uitsluitingschromatografie (SEC) en anioonuitruilchromatografie word gebruik om homogene CLK1 sonder heterogene fosforilering te verkry.

Proteïene vir antigeengebruik: Suiwerheidsbepaling is nodig om kontaminasie met hoogs immunogeniese proteïene te vermy. Vir strukturele epitoop-teenliggaampies moet die driedimensionele konformasie van die antigeen gehandhaaf word.

Aggregasie-geneigde proteïene: Strategieë soos die sifting van verskillende stamme en die verlaging van verbouingstemperature word aangewend om aggregasiekwessies te beperk, en vinnige suiweringstrategieë word ontwerp.

Endotoksien verwydering: Metodes soos positiewe lading chromatografie en polikation ligand affiniteit chromatografie verwyder endotoksiene, om te verseker dat LPS vlakke onder toedieningslimiete is.

Proteïenkomplekse: Subeenhede word afsonderlik uitgedruk en in vitro saamgestel of saam uitgedruk om funksionele komplekse te vorm. Komplekse integriteit word geëvalueer deur homogeniteit en molêre massa.

Gevolgtrekking

Proteïenproduksie begin met strategiese ontwerp, met inagneming van biochemiese eienskappe en toepassings. Tydens uitdrukking, suiwering en QC word toestande en metodes geoptimaliseer vir stabiliteit, nie-aggregasie en inheemse toestand. Gesuiwerde proteïene dien verskeie stroomafgebruike, soos biofisiese karakterisering.

Yaohai Bio-Pharma is ook aktief op soek na institusionele of individuele globale vennote en bied die mees mededingende vergoeding in die bedryf. As jy enige vrae het, voel asseblief vry om ons te kontak: [email protected]