Tiết lộ Liều Lượng Tối Ưu của RNA Reporter eGFP

Trong sinh học phân tử và công nghệ sinh học, protein phát quang xanh huỳnh quang tăng cường (eGFP) đã nổi lên như một gen báo cáo quan trọng nhờ khả năng tạo ra ánh sáng xanh huỳnh quang mạnh ở bước sóng 509 nm. Protein này, ban đầu được cô lập từ sứa Aequorea victoria, là dấu hiệu phát hiện trực tiếp trong các nền văn hóa tế bào động vật có vú, giúp theo dõi và tối ưu hóa hiệu suất chuyển gen. Tuy nhiên, câu hỏi được đặt ra là: liều lượng RNA reporter eGFP tối ưu cần đạt mức biểu hiện mong muốn là bao nhiêu?

Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng hiệu quả của RNA reporter eGFP phụ thuộc rất nhiều vào liều lượng, đặc biệt trong bối cảnh của RNA vòng (circRNA) và mRNA tự tăng cường (saRNA). Các nghiên cứu do nhóm Katrien Remaut tại Nhóm Nghiên cứu Nanomedicine của Đại học Ghent thực hiện đã làm nổi bật mối quan hệ phức tạp giữa liều lượng saRNA và hiệu suất dịch trong tế bào võng mạc. Họ phát hiện rằng liều lượng thấp của saRNA, dưới ngưỡng kích hoạt miễn dịch bẩm sinh, giúp thúc đẩy biểu hiện protein hiệu quả. Điều này nhấn mạnh tầm quan trọng của việc kiểm soát liều lượng chính xác để khai thác hết tiềm năng của RNA reporter eGFP.

Trong các ứng dụng thực tế, nồng độ mRNA eGFP thường sử dụng có thể dao động từ microgam (μg) đến nanogam trên microlít (ng/μL). Ví dụ, trong các thí nghiệm chuyển gen, liều lượng từ 0,05 μg đến 0,5 μg mRNA eGFP đã được chứng minh là tạo ra mức biểu hiện đáng kể trong nhiều loại tế bào khác nhau, với tỷ lệ tế bào dương tính đạt tới 99-100% trong một số trường hợp. Đáng chú ý, ở liều dưới 0,1 μg, saRNA cho thấy mức biểu hiện vượt trội hơn so với mRNA tuyến tính, chứng tỏ lợi thế tự khuếch đại của nó.

Sự đa dạng của RNA chỉ báo eGFP không chỉ nằm ở ánh huỳnh quang sáng và ổn định mà còn ở khả năng thích ứng với các thiết lập thí nghiệm khác nhau. Các nhà nghiên cứu có thể điều chỉnh liều lượng để đáp ứng nhu cầu cụ thể của mình, đảm bảo kiểm soát chính xác mức độ biểu hiện gen. Đặc điểm này khiến eGFP trở thành công cụ vô giá để nghiên cứu chức năng gen, theo dõi số phận tế bào và tối ưu hóa các giao thức chuyển gen.

Tóm lại, liều lượng tối ưu của RNA reporter eGFP phụ thuộc rất nhiều vào bối cảnh thí nghiệm và kết quả mong muốn. Bằng cách cẩn thận chọn liều phù hợp, các nhà nghiên cứu có thể khai thác hết tiềm năng của gen reporter đa dụng này, thúc đẩy sự hiểu biết về các cơ chế phân tử và thúc đẩy đổi mới trong sinh học.

Yaohai Bio-Pharma là công ty sinh học đầu tiên và lớn nhất chuyên về hệ thống biểu hiện vi sinh CRDMO tại Đại Trung Hoa. Chúng tôi cam kết đáp ứng nhu cầu lâm sàng và thương mại của khách hàng toàn cầu đối với thuốc sinh học, vắc xin và chẩn đoán cho cả người và thú y.

Chúng tôi cũng đang tích cực tìm kiếm đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân. Chúng tôi cung cấp mức bồi thường cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]