Tiết lộ liều lượng tối ưu của RNA báo cáo eGFP

Trong sinh học phân tử và công nghệ sinh học, protein huỳnh quang xanh tăng cường (eGFP) đã nổi lên như một gen báo cáo quan trọng do khả năng tạo ra huỳnh quang xanh sáng ở 509 nm. Protein này, ban đầu được phân lập từ loài sứa Aequorea victoria, là một dấu hiệu phát hiện trực tiếp trong nuôi cấy tế bào động vật có vú, tạo điều kiện thuận lợi cho việc theo dõi và tối ưu hóa hiệu quả chuyển gen. Tuy nhiên, câu hỏi đặt ra là: liều lượng tối ưu của RNA báo cáo eGFP để đạt được mức biểu hiện mong muốn là bao nhiêu?

Nghiên cứu đã chỉ ra rằng hiệu quả của RNA báo cáo eGFP phụ thuộc rất nhiều vào liều lượng của nó, đặc biệt là trong bối cảnh của các hệ thống RNA vòng (circRNA) và mRNA tự khuếch đại (saRNA). Các nghiên cứu do nhóm Katrien Remaut tại Nhóm nghiên cứu Nanomedicine của Đại học Ghent thực hiện đã làm nổi bật mối quan hệ phức tạp giữa liều lượng saRNA và hiệu quả dịch mã của nó trong các tế bào võng mạc. Họ phát hiện ra rằng liều lượng saRNA thấp, dưới ngưỡng kích hoạt miễn dịch bẩm sinh, tạo điều kiện cho biểu hiện protein hiệu quả. Điều này nhấn mạnh tầm quan trọng của việc kiểm soát liều lượng chính xác trong việc khai thác toàn bộ tiềm năng của RNA báo cáo eGFP.

Trong các ứng dụng thực tế, nồng độ thường dùng của mRNA eGFP có thể dao động từ microgam (μg) đến nanogam trên microlit (ng/μL). Ví dụ, trong các thí nghiệm chuyển gen, liều lượng dao động từ 0.05 μg đến 0.5 μg mRNA eGFP đã được chứng minh là tạo ra mức độ biểu hiện đáng kể ở nhiều loại tế bào khác nhau, với tỷ lệ tế bào dương tính đạt tới 99-100% trong một số trường hợp. Đáng chú ý, ở liều lượng dưới 0.1 μg, saRNA thể hiện mức độ biểu hiện vượt trội so với mRNA tuyến tính, chứng minh lợi thế tự khuếch đại của nó.

Tính linh hoạt của RNA báo cáo eGFP không chỉ nằm ở huỳnh quang sáng và ổn định mà còn ở khả năng thích ứng với các thiết lập thử nghiệm khác nhau. Các nhà nghiên cứu có thể tinh chỉnh liều lượng để phù hợp với nhu cầu cụ thể của họ, đảm bảo kiểm soát chính xác mức độ biểu hiện gen. Tính năng này khiến eGFP trở thành một công cụ vô giá để nghiên cứu chức năng gen, theo dõi số phận tế bào và tối ưu hóa các giao thức chuyển gen.

Tóm lại, liều lượng tối ưu của RNA báo cáo eGFP phụ thuộc rất nhiều vào bối cảnh thử nghiệm và kết quả mong muốn. Bằng cách lựa chọn cẩn thận liều lượng thích hợp, các nhà nghiên cứu có thể khai thác toàn bộ tiềm năng của gen báo cáo đa năng này, thúc đẩy sự hiểu biết của chúng ta về cơ chế phân tử và thúc đẩy đổi mới trong công nghệ sinh học.

Yaohai Bio-Pharma là công ty sinh học đầu tiên và lớn nhất chuyên về hệ thống biểu hiện vi khuẩn CRDMO tại Trung Quốc. Chúng tôi cam kết đáp ứng nhu cầu lâm sàng và thương mại của khách hàng toàn cầu về thuốc sinh học, vắc-xin và chẩn đoán dùng cho người và thú y.

Chúng tôi cũng đang tích cực tìm kiếm các đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân. Chúng tôi cung cấp mức bồi thường cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]