Sản Xuất Protein Kỹ Thuật Gen: Các Chủng E. coli Được Thiết Kế

Escherichia coli (E. coli) đã đóng vai trò quan trọng trong việc sản xuất protein tái tổ hợp trong ngành công nghiệp sinh dược, phục vụ như vector biểu hiện đầu tiên để sản xuất thuốc sinh học. E. coli có ưu điểm là tăng trưởng nhanh, thao tác di truyền thuận tiện và tổng hợp protein tái tổ hợp nhanh chóng. Các sửa đổi rộng rãi đã khiến E. coli trở thành lựa chọn tối ưu cho biểu hiện protein, dẫn đến việc thiết kế nhiều chủng E. coli được biến đổi gen khác nhau.

Yaohai Bio-Pharma chuyên cung cấp dịch vụ外包 trọn gói về lên men, tinh chế, phát triển quy trình phối chế và sản xuất loạt sinh dược phẩm sử dụng hệ thống biểu hiện E. coli. Dựa trên kinh nghiệm phong phú của Yaohai, chúng tôi tóm tắt rằng bốn chủng E. coli phổ biến được sử dụng để sản xuất protein tái tổ hợp và các đặc điểm của chúng.

Chủng BL 21

Phát sinh từ dòng E. coli B, chủng BL21 thiếu protease Lon và protease màng ngoài OmpT. Protease Lon chủ yếu phân giải các protein ngoại sinh, trong khi OmpT chủ yếu phân giải các protein trong ma trận ngoại bào. Sự thiếu vắng của hai protease chính này có thể hiệu quả ngăn chặn sự phân giải của các protein tái tổ hợp.

Chủng Origami

Chủng Origami, một dẫn xuất của E. coli K-12, có đột biến trong enzym thioredoxin reductase và glutathione reductase, điều này giúp hình thành các protein gập đúng chứa liên kết disulfide và tăng cường độ tan của protein. Các chủng Origami, bao gồm Origami, Origami 2 và Origami B, phù hợp để biểu hiện các protein hoạt tính chứa liên kết disulfide.

Chủng SHuffle

Chủng SHuffle biểu hiện cấu tử enzyme isomerase liên kết disulfua DsbC trong bào tương, thúc đẩy quá trình hình thành các liên kết disulfua đúng trong protein bị oxi hóa. Nó cũng hoạt động như một protein trợ giúp gập protein, hỗ trợ tạo ra cấu trúc chính xác.

Chủng Rosetta

Chủng Rosetta bổ sung cho E. coli các tRNA tương ứng với các codon hiếm, nhằm cải thiện mức độ biểu hiện của gen ngoại lai, đặc biệt là gen eukaryote, trong hệ thống prokaryote. Được phái sinh từ BL21 và mang plasmid pRARE kháng chloramphenicol, nó bổ sung sáu tRNA tương ứng với các codon hiếm (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC và GGA) vốn ban đầu không có trong E. coli, cung cấp một môi trường biểu hiện protein "toàn diện" hơn.

Phần kết luận

Ba yếu tố chính cho việc sản xuất protein tái tổ hợp thành công là vật chủ, vector và điều kiện nuôi cấy. Dựa trên sự hiểu biết về các đặc tính lý hóa của protein tái tổ hợp, những lợi thế độc đáo của mỗi chủng và nhu cầu cụ thể của thí nghiệm, vật chủ phù hợp nhất nên được lựa chọn. Ngoài ra, các yếu tố như vector plasmid, nhiệt độ và chất cảm ứng cần được tối ưu hóa để tăng cường biểu hiện protein.

Yaohai Bio-Pharma cũng đang tích cực tìm kiếm đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân và cung cấp mức bồi thường cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]