Khám phá thế giới hấp dẫn của quá trình kết tủa Lithium Chloride

Kết tủa Liti clorua được sử dụng rộng rãi để tách RNA ra khỏi dung dịch.

Sau đây là chi tiết về quá trình này:

1. Chuẩn bị mẫu: Bắt đầu với một mẫu có chứa RNA, chẳng hạn như trong ống nghiệm hỗn hợp bản sao.

2. Thêm liti clorua: Thêm một thể tích dung dịch liti clorua đậm đặc thích hợp vào dung dịch RNA.

3. Ủ: Sau khi thêm liti clorua, dung dịch được ủ ở nhiệt độ thấp, thường là khoảng -20°C. Điều này khiến các phân tử RNA kết tủa ra khỏi dung dịch.

4. Ly tâm: Sau khi ủ, dung dịch được ly tâm ở tốc độ cao. Điều này tách RNA kết tủa khỏi phần còn lại của dung dịch, chứa tạp chất.

5. Rửa: Sau khi ly tâm hoàn tất, hãy cẩn thận loại bỏ phần chất lỏng nổi nhưng không can thiệp vào quá trình kết tủa RNA. Rửa các hạt RNA bằng ethanol lạnh hoặc isopropyl alcohol để loại bỏ bất kỳ tạp chất nào còn sót lại.

6. Tái huyền phù RNA: Sau khi rửa, kết tủa RNA được sấy khô trong không khí trong thời gian ngắn và sau đó được tái huyền phù trong một dung dịch đệm thích hợp, chẳng hạn như dung dịch đệm TE (đệm Tris-EDTA) hoặc nước cất. Có thể cần phải dùng pipet nhẹ nhàng hoặc dòng điện xoáy để tái huyền phù RNA một cách đầy đủ.

7. Định lượng và phân tích: Cuối cùng, RNA cô lập được định lượng bằng phương pháp quang phổ tử ngoại hoặc phương pháp huỳnh quang. Điều này xác định nồng độ và độ tinh khiết của mẫu RNA, điều này rất quan trọng đối với các ứng dụng hạ nguồn như đóng gói LNP và chuyển gen tế bào.

Yaohai Bio-Pharma có kỹ năng sử dụng phương pháp kết tủa liti clorua trong quy trình sản xuất vì phương pháp này đơn giản, chi phí thấp và tạo ra RNA chất lượng cao phù hợp với nhiều ứng dụng sinh học phân tử. Tuy nhiên, điều quan trọng là phải tối ưu hóa các điều kiện (ví dụ: nồng độ liti clorua, thời gian ủ, tốc độ ly tâm) để đạt được kết quả tốt nhất cho một mẫu cụ thể.

Dựa trên nền tảng RNASci mạnh mẽ và độc quyền của mình, chúng tôi cũng cung cấp các dịch vụ tổng hợp RNA theo yêu cầu, cũng như mRNA (lên đến 10 kb), circRNA (lên đến 4 kb) và các sản phẩm danh mục LNP. Chúng tôi đã thiết lập một bộ công nghệ tổng hợp mRNA/circRNA hoàn chỉnh để cung cấp RNA chất lượng cao, chẳng hạn như thiết kế và tối ưu hóa trình tự, IVT, tuần hoàn hóa, tinh chế và đóng gói LNP. Tất cả các sản phẩm đều được phát hành theo các tiêu chuẩn kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt.

Yaohai Bio-Pharma là CRDMO sinh học đầu tiên và lớn nhất dành riêng cho các hệ thống biểu hiện vi khuẩn tại Trung Quốc. Chúng tôi cung cấp các giải pháp trọn gói hoặc dịch vụ độc lập từ tổng hợp RNA, kỹ thuật chủng và xây dựng, phát triển quy trình thượng nguồn và hạ nguồn, đến sản xuất dược chất cấp GMP hoặc không cấp GMP, và dịch vụ chiết rót & hoàn thiện cho nhiều phương thức khác nhau, chẳng hạn như mRNA, circRNA, plasmid RNA, protein tái tổ hợp, peptide, enzyme, kháng thể miền đơn (sdAbs) và VLP. Chúng tôi cam kết đáp ứng nhu cầu lâm sàng và thương mại của khách hàng toàn cầu về thuốc sinh học, vắc-xin và chẩn đoán cho cả mục đích sử dụng của con người và thú y.

Yaohai Bio-Pharma cũng đang tích cực tìm kiếm các đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân và cung cấp mức lương cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]