Mẫu plasmid mRNA: Các yếu tố chính và chiến lược thiết kế

Việc tạo mRNA cho vắc-xin hoặc liệu pháp bắt đầu bằng một khuôn mẫu plasmid được thiết kế tốt. Sau đây là hướng dẫn nhanh về các yếu tố chính và cách chúng được tối ưu hóa để thành công.

Người thúc đẩy: Nơi phiên mã bắt đầu

Bộ khởi động T7 là lựa chọn phổ biến nhất để bắt đầu tổng hợp mRNA. Trình tự cổ điển của nó, “TAATACGACTCACTATAGGG,” đảm bảo phiên mã hiệu quả. Theo thời gian, các nhà khoa học đã phát triển các biến thể như khuôn mẫu GG, AG và AT/AU để hoạt động với các hệ thống mũ tiên tiến, chẳng hạn như CleanCap hoặc nền tảng RNA tự khuếch đại.

Tuyến tính hóa: Cắt Plasmid để có độ chính xác

Để ngăn plasmid không phiên mã liên tục, nó cần phải được cắt ở một vị trí cụ thể. Các enzyme loại IIS, như BspQⅠ hoặc BsaⅠ, hoàn hảo cho công việc này. Chúng cắt DNA bên ngoài trình tự nhận dạng của chúng, không để lại bất kỳ bit thừa nào và bảo toàn đuôi polyA quan trọng.

Bản thiết kế mRNA: Các khối xây dựng thành công

Trình tự mRNA bao gồm mũ 5', vùng không dịch mã (UTR), trình tự mã hóa (CDS) và đuôi polyA. Sau đây là cách thiết kế từng phần:

• UTR: Chúng có thể được mượn từ các gen tự nhiên có biểu hiện cao (như gen trong vi-rút) hoặc được thiết kế riêng bằng các thuật toán tiên tiến để có hiệu suất tốt hơn.
• CDS:Đầu tiên, các nhà khoa học thiết kế trình tự protein, sau đó tối ưu hóa mã DNA để biểu hiện hiệu quả.
• Đuôi PolyA: Một đoạn gồm 100–120 adenine hoặc phiên bản phân đoạn như 30A + Linker + 70A đảm bảo mRNA luôn ổn định và hoạt động tốt.

Bằng cách nắm vững các yếu tố này, các nhà nghiên cứu có thể tạo ra các mẫu mRNA mạnh mẽ cho mọi thứ, từ vắc-xin đến các liệu pháp tiên tiến. Tương lai của y học bắt đầu từ đây!

Yaohai Bio-Pharma là một doanh nghiệp nền tảng chuyên về dịch vụ cho các hệ thống biểu hiện vi khuẩn. Với một thập kỷ kinh nghiệm, Yaohai đã phát triển một bộ công nghệ toàn diện tuân thủ GMP để tổng hợp mRNA tuyến tính và vòng, cung cấp các sản phẩm RNA chất lượng cao bao gồm thiết kế và tối ưu hóa trình tự, tổng hợp gen, phiên mã trong ống nghiệm (IVT), tuần hoàn hóa, tinh chế RNA và đóng gói LNP.

Chúng tôi cũng đang tích cực tìm kiếm các đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân. Chúng tôi cung cấp mức bồi thường cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]