Nghiên cứu độ tinh khiết của RNA: Sắc ký trao đổi ion

Sắc ký trao đổi ion làm sạch RNA hiệu quả bằng cách tách các phân tử có điện tích khác nhau. Tùy thuộc vào trạng thái proton hóa của chúng ở các mức pH khác nhau, các phân tử RNA có thể mang điện tích dương hoặc âm. Tính chất này được sử dụng trong sắc ký trao đổi ion để kiểm soát các tương tác giữa RNA và pha tĩnh bằng cách điều chỉnh cường độ ion và độ pH của dung dịch, do đó đạt được sự tách biệt.

Là CRDMO về sinh học vi sinh đầu tiên và lớn nhất tại Trung Quốc, Yaohai Bio-Pharma cung cấp các giải pháp trọn gói hoặc dịch vụ độc lập từ tổng hợp RNA, kỹ thuật và xây dựng chủng, phát triển quy trình đầu nguồn và cuối nguồn, đến sản xuất dược chất đạt chuẩn GMP hoặc không đạt chuẩn GMP, cũng như dịch vụ chiết rót & hoàn thiện cho nhiều phương thức khác nhau, chẳng hạn như mRNA, circRNA, RNA plasmid, protein tái tổ hợp, peptide, enzyme, kháng thể miền đơn và VLP để sử dụng cho người và thú y.

Hãy cùng khám phá những ứng dụng mà sắc ký trao đổi ion mang lại cho các quy trình tinh chế cụ thể.

1. Chuẩn bị mẫu: Hòa tan hỗn hợp phức hợp chứa các phân tử sinh học mục tiêu trong dung dịch đệm thích hợp. Việc lựa chọn độ pH có thể ảnh hưởng đến trạng thái tích điện của các phân tử sinh học, do đó ảnh hưởng đến hiệu quả tách.

2. Lựa chọn cột: Chọn loại cột trao đổi ion phù hợp dựa trên đặc điểm điện tích của các phân tử mục tiêu. Vật liệu cột phổ biến bao gồm nhựa trao đổi cation và nhựa trao đổi anion, tùy thuộc vào điện tích của các phân tử mục tiêu.

3. Nạp mẫu: Cho dung dịch mẫu đã chuẩn bị qua cột sắc ký. Các nhóm chức năng trên nhựa trao đổi ion tương tác với các ion tích điện trong mẫu, tạo ra thời gian lưu khác nhau cho các phân tử có đặc tính tích điện khác nhau.

4. Quy trình rửa giải: Sử dụng dung dịch đệm rửa giải có cường độ ion tăng dần hoặc pH thay đổi để rửa giải các phân tử sinh học mục tiêu khỏi cột. Các điều kiện rửa giải này dần dần thay đổi tương tác giữa các phân tử sinh học và nhựa trao đổi ion, đạt được sự tinh khiết của các phân tử mục tiêu.

5. Thu thập các phân tử mục tiêu tinh khiết: Thu thập và phân tích các phần tinh khiết của các phân tử sinh học mục tiêu dựa trên đặc điểm hấp phụ và trình tự rửa giải của chúng.

6. Hậu xử lý: Thực hiện các bước hậu xử lý cần thiết đối với các phân tử mục tiêu đã thu thập, chẳng hạn như cô đặc, hòa tan, kết tinh lại, v.v., để thu được sản phẩm cuối cùng có độ tinh khiết và hoạt tính cao.

Sắc ký trao đổi ion có giá trị trong ngành công nghiệp dược phẩm sinh học và sinh hóa vì khả năng làm sạch hiệu quả các phân tử sinh học như protein, axit nucleic và peptide, cung cấp các sản phẩm có độ tinh khiết cao cần thiết cho các ứng dụng nghiên cứu, chẩn đoán và điều trị.

Yaohai Bio-Pharma cũng đang tích cực tìm kiếm các đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân và cung cấp mức lương cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]