Відкриття оптимальної дози РНК-репортера eGFP

У молекулярній біології та біотехнології, покращений зелений флуоресцентний белок (eGFP) став ключовим репортёрним геном завдяки своїй здатності виробляти яскраво-зелений флуоресцентний світло в хвилі 509 нм. Цей белок, який спочатку був ізолюваний від медузі Aequorea victoria, є маркером безпосереднього виявлення у культурах сусільних клітин, сприяючи моніторингу та оптимізації ефективності трансфекції. Проте виникає питання: яка найкраща доза репортёрної РНК eGFP для досягнення бажаних рівнів вираженості?

Дослідження показали, що ефективність eGFP репортерної РНК сильно залежить від її дози, особливо у контексті циркулярної РНК (circRNA) та самоповторюваної мРНК (saRNA). Дослідження, проведені групою Катрієн Ремаут у Наномедичному Дослідницькому Центрі Університету Генту, виявили складну взаємозв'язок між дозою saRNA та її ефективністю перекладу у ретинальних клітинах. Вони виявили, що низькі дози saRNA, нижче порогу активації вродженої імунної системи, сприяють ефективному виразу протеїну. Це підкреслює важливість точного контролю дози для використання всього потенціалу eGFP репортерної РНК.

У практичних застосуваннях звичайні концентрації mRNA eGFP можуть варіювати від мікrogramів (μg) до нанограмів на мікролітр (ng/μL). Наприклад, у експериментах з трансфекцією дози від 0.05 μg до 0.5 μg mRNA eGFP показали значні рівні експресії у різних типах клітин, з відсотком позитивних клітин, що досягає 99-100% у деяких випадках. Зазначено, що при дозах нижче 0.1 μg, saRNA демонструє кращі рівні експресії порівняно з лінійним mRNA, що проявляє його перевагу самоповторюваності.

Всеохватність RNA-репортера eGFP полягає не тільки у яскравій і стабільній флуоресценції, але й у його адаптивності до різних експериментальних установок. Дослідники можуть точno налаштувати дозу для задовolenня своїх специфічних потреб, забезпечуючи точну керування рівнем експресії генів. Ця особливість робить eGFP незамінним інструментом для вивчення функції генів, контролю судьби клітин та оптимізації протоколів трансфекції.

У висновку, оптимальна доза репортерної РНК eGFP сильно залежить від експериментального контексту та бажаних результатів. Обираючи відповідну дозу, дослідники можуть використати повний потенціал цього гнучкого репортерного гена, продовжуючи розуміння молекулярних механізмів та стимулюючи інновації в біотехнології.

Yaohai Bio-Pharma є першою та найбільшою компанією, присвяченою мікробному виразному системному CRDMO в Великому Китаї. Ми присвячені задовolenню клінічних та комерційних потреб наших глобальних клієнтів щодо біологоактивних лікарських засобів, вакцин та діагностичних тестів для людини та ветеринарного використання.

Ми також активно шукаємо глобальних партнерів серед установ або окремих осіб. Ми пропонуємо найбільш конкурентоспроможну компенсацію в галузі. Якщо в вас є будь-які питання, будь ласка, не соромтеся звертатися до нас: [email protected]