Шаблони плазмід мРНК: ключові елементи та стратегії дизайну

Створення мРНК для вакцин або терапії починається з добре розробленої матриці плазміди. Ось короткий посібник щодо ключових елементів і способів їх оптимізації для успіху.

Промоутер: з чого починається транскрипція

Промотор Т7 є найпопулярнішим вибором для початку синтезу мРНК. Його класична послідовність «TAATACGACTCACTATAGGG» забезпечує ефективну транскрипцію. Згодом вчені розробили такі варіації, як шаблони GG, AG і AT/AU, для роботи з передовими системами обмеження, такими як CleanCap або самоампліфікуючі РНК-платформи.

Лінеаризація: розрізання плазміди для точності

Щоб припинити нескінченну транскрипцію плазміди, її потрібно розрізати в певному місці. Ферменти типу IIS, такі як BspQⅠ або BsaⅠ, ідеально підходять для цієї роботи. Вони відрізають ДНК за межами своєї послідовності розпізнавання, не залишаючи зайвих частинок і зберігаючи важливий хвіст polyA.

План мРНК: будівельні блоки успіху

Послідовність мРНК включає 5'-кеп, нетрансльовані ділянки (UTR), кодуючу послідовність (CDS) і хвіст polyA. Ось як влаштована кожна частина:

• UTR: їх можна запозичити з високо виражених природних генів (наприклад, у вірусах) або розробити на замовлення за допомогою передових алгоритмів для кращої продуктивності.
• CDS: спочатку вчені розробляють білкову послідовність, а потім оптимізують код ДНК для ефективної експресії.
• Хвіст PolyA: Розтягнення 100–120 аденінів або сегментована версія, як-от 30A + Linker + 70A, гарантує, що мРНК залишається стабільною та функціональною.

Опанувавши ці елементи, дослідники можуть створювати потужні шаблони мРНК для всього, від вакцин до передових методів лікування. Майбутнє медицини починається тут!

Yaohai Bio-Pharma — це компанія-платформа, що спеціалізується на послугах систем експресії мікроорганізмів. Спираючись на десятирічний досвід, Yaohai розробила повний набір технологій, сумісних із GMP, для синтезу лінійної та кільцевої мРНК, пропонуючи високоякісні продукти РНК, які охоплюють дизайн та оптимізацію послідовності, синтез генів, транскрипцію in vitro (IVT), циркулярізацію, очищення РНК та інкапсуляцію LNP.

Ми також активно шукаємо інституційних або індивідуальних глобальних партнерів. Ми пропонуємо найконкурентнішу компенсацію в галузі. Якщо у вас виникли запитання, зв’яжіться з нами: [email protected]