шаблони плазмідів mRNA: ключові елементи та стратегії дизайну

Створення mRNA для вакцин або терапій починається з добре спроектованого плазмідного шаблону. Ось коротке посібник до ключових елементів та як вони оптимізуються для успіху.

Промотор: Де починається транскрипція

Промотор T7 є найпопулярнішим вибором для початку синтезу mRNA. Його класична послідовність, «TAATACGACTCACTATAGGG», забезпечує ефективну транскрипцію. З часом, вчені розробили варіації, такі як шаблони GG, AG і AT/AU, щоб працювати з передовими системами капування, такими як CleanCap або саморепlicating RNA-платформи.

Лінеаризація: Розріз плазміду для точності

Щоб запобігти безперервній транскрипції плазміду, його необхідно розрізати у конкретному місці. Ензими типу IIS, такими як BspQⅠ або BsaⅠ, ідеально підходять для цього завдання. Вони розрізають ДНК поза їхньою послідовністю розпізнавання, залишаючи позаду жодних додаткових частинок і зберігаючи критичний поліА хвіст.

Шаблон mRNA: Будівельні блоки успіху

Послідовність mRNA містить 5' кап, неперекладені регіони (UTRs), кодуючу послідовність (CDS) та поліаденіновий хвіст. Ось як кожна частина проектується:

• UTRs : Їх можна позичувати від природних генів з високою експресією (наприклад, з вірусів) або створювати за допомогою сучасних алгоритмів для кращої продуктивності.
• КДС : Науковці спочатку проектують послідовність білок, потім оптимізують ДНК-код для ефективної експресії.
• Поліаденіновий хвіст : Серія з 100–120 аденинів або сегментована версія, наприклад, 30A + Лінкер + 70A, забезпечує стабільність та функціональність mRNA.

Володіючи цими елементами, дослідники можуть створювати потужні шаблони mRNA для різноманітних завдань — від вакцин до передових терапевтичних методів. Майбутнє медицини починається саме тут!

Yaohai Bio-Pharma — це платформенна компанія, яка спеціалізується на послугах для систем мікробіального виражування. Використовуючи десятирічний досвід, Yaohai розробила комплексний набір технологій, що відповідають стандартам GMP для синтезу лінійної та циркулярної mRNA, пропонуючи високоякісні РНК-продукти, які охоплюють проектування та оптимізацію послідовностей, синтез генів, транскрипцію in vitro (IVT), циркуляризацію, очищення РНК та енкапсуляцію ЛНП.

Ми також активно шукаємо глобальних партнерів серед установ або окремих осіб. Ми пропонуємо найбільш конкурентоспроможну компенсацію в галузі. Якщо в вас є будь-які питання, будь ласка, не соромтеся звертатися до нас: [email protected]