Еволюція Генотерапії: Нові Типи ДНК та Оптимізація

У сфері застосувань ДНК, плазмідна ДНК (pDNA) завжди користувалася великою популярністю завдяки своєму винятковому стабільності, легкості виробництва, зберігання та перевезення. Проте, з поступовим розвитком наукових досліджень, з'явилися нові типи ДНК, такі як Мінікола ДНК (mcDNA), Доггібон ДНК (dbDNA) та Закрита ДНК (ceDNA), що відкрили нові можливості для генної терапії та інших передових галузей.

mcDNA

mcDNA отримується у процесі рекомбінації батьківських плазмідів, при цьому бактеріальні елементи видаляються, а кругла структура зберігається. Її підготовка залежить від специфічної ензимної активності, наприклад, φC31 інтегразу, що забезпечує вищу ефективність рекомбінації. Важливою особливістю mcDNA є відсутність бактеріальних послідовностей, що дозволяє їй використовувати малі ДНК-носії, покращуючи вираження генів.

dbDNA

dbDNA має закриту подвійну спіральну конформацію, з маленькими одноланцюговими петлями на обох кінцях і повністю вільна від бактеріальних послідовностей та генів супорту антибіотиків. Її менший розмір сприяє легшому доставленню до клітин та ядер, при цьому вона відбуває повний опір нуклеазам. Початкова форма dbDNA містить лише необхідні елементи для експресії генів, виключуючи зайві послідовності, тому вона має потужні можливості генної трансфекції та вищі рівні експресії белків.

ceDNA

ceDNA — це інженерна двозначна, лінійна, ковалентно закрита з кінців DNA-конструкція, яка містить цільовий ген та інші регуляторні елементи вираження. Її кінці є обернутими термінальними повторами (ITR), що забезпечують ємність конструкції у тисячі баз, значно перевершуючи межі традиційних адено-асоційованих вірусних (AAV) векторів. ITR-структура ceDNA є ключовою для входження до ядра, а її паттерн вираження відповідає непідінтегрованим епісомам. Крім того, процес підготовки ceDNA швидкий та економічний, що робить його придатним для досліджень генної терапії в таких галузях, як рідкі захворювання, вакцини та онкологія.

Оптимізація DNA

У термінах оптимізації ДНК, дослідники покращують вираження трансгеннічних генів шляхом оптимізації власних компонентів плазмідної ДНК. одночасно замінюються селекційні маркери, наприклад, ампіцилін замінюється канаміцином, щоб зменшити автовімогні ризики. Крім того, також використовується цукровий селекційний систем для заміни традиційних селекційних маркерів. У контексті оптимізації кодонів, дослідники підвищують рівень вираження протеїнів, змінюючи використання кодонів, повністю враховуючи переваги господаря щодо вираження послідовності генів. Під час процесу оптимізації дослідники також повинні враховувати нахил кодонів, стабільність вторинної структури мРНК, уникнення транс-діючих елементів і місць розрізання рестрикційними ензимами, а також баланс GC-вмісту.

У зagalnі, розробка нових типів ДНК та оптимізація ДНК відкрили нові можливості та виклики для сфер, таких як генна терапія. Yaohai Bio-Pharma створила платформу GMP для виробництва як циркулярних, так і лінійних плазмід. Yaohai також може надати розробку процесів та їх оптимізацію для різних типів ДНК, включаючи ці нові види ДНК, задовольняючи різні потреби клієнтів.

Yaohai Bio-Pharma також активно шукає глобальних партнерів — інституцій або осіб — і пропонує найбільш конкурентоспроможну компенсацію в галузі. Якщо у вас є будь-які питання, будь ласка, не соромтеся звертатися до нас: [email protected]