Еволюція генної терапії: нова ДНК та оптимізація

У сфері застосування ДНК плазмідна ДНК (пДНК) завжди користувалася великою перевагою завдяки своїй винятковій стабільності, простоті виробництва, зберігання та транспортування. Однак у міру того, як наукові дослідження продовжують просуватися, поступово з’явилася низка нових типів ДНК, таких як ДНК міні-кола (mcDNA), ДНК Doggybone (dbDNA) і ДНК із закритими кінцями (ceDNA), що відкриває нові шляхи для генної терапії. та інші передові галузі.

мкДНК

mcDNA утворюється в результаті процесу рекомбінації батьківських плазмід із видаленням бактеріальних елементів із збереженням кільцевої структури. Процес його приготування базується на специфічних ферментативних активностях, таких як φC31-інтеграза, що забезпечує більш високу ефективність рекомбінації. Примітною характеристикою mcDNA є відсутність бактеріальних послідовностей, що дозволяє їй покладатися на малі носії ДНК, тим самим покращуючи експресію генів.

dbDNA

dbDNA має закриту дволанцюгову конформацію, що містить невеликі одноланцюгові петлі на обох кінцях і повністю вільна від бактеріальних послідовностей і генів стійкості до антибіотиків. Його менший розмір полегшує доставку в клітини та ядра, демонструючи повну стійкість до нуклеази. Початкова форма dbDNA містить лише необхідні елементи для експресії генів, пропускаючи непотрібні послідовності, таким чином володіючи потужними можливостями трансфекції генів і більш високими рівнями експресії білка.

цеДНК

цеДНК — це сконструйована дволанцюгова лінійна конструкція ДНК із ковалентним замкнутим кінцем, що містить цільовий ген та інші регуляторні елементи експресії. Його кінці є інвертованими кінцевими повторами (ITR), що забезпечує ємність конструкції в тисячі основ, що значно перевищує межі традиційних векторів аденоасоційованого вірусу (AAV). Структура ITR цеДНК має вирішальне значення для входження в ядро, і її модель експресії відповідає неінтегрованим епісомам. Крім того, процес підготовки ceDNA є швидким і економічно ефективним, що робить його придатним для досліджень генної терапії в таких сферах, як рідкісні захворювання, вакцини та онкологія.

Оптимізація ДНК

Що стосується оптимізації ДНК, дослідники посилюють експресію трансгенних генів шляхом оптимізації внутрішніх компонентів плазмідної ДНК. Одночасно замінюють селекційні маркери, наприклад, замінюють ампіцилін на канаміцин, щоб зменшити аутоімунні ризики. Крім того, система відбору сахарози також використовується для заміни традиційних маркерів відбору. З точки зору оптимізації кодонів, дослідники покращують рівні експресії білка, змінюючи використання кодонів, повністю враховуючи переваги господаря щодо експресії генної послідовності. Під час процесу оптимізації дослідники також повинні звернути увагу на зміщення кодонів, стабільність вторинної структури мРНК, уникнення трансдіючих елементів і сайтів рестриктаз, а також баланс вмісту GC.

Таким чином, розробка нових типів ДНК та оптимізація ДНК створили нові можливості та виклики для таких галузей, як генна терапія. Компанія Yaohai Bio-Pharma створила платформи для виробництва GMP як для круглих, так і для лінеаризованих плазмід. Yaohai також може забезпечити розробку процесів і оптимізацію різних типів ДНК, включаючи ці нові типи ДНК, задовольняючи різні потреби клієнтів.

Yaohai Bio-Pharma також активно шукає інституційних або індивідуальних глобальних партнерів і пропонує найконкурентнішу компенсацію в галузі. Якщо у вас виникли запитання, зв’яжіться з нами: [email protected]