Сьогодні Yaohai дуже цікаво поділитися своїм протоколом стенограми in vitro для довгої РНК. Це ефективна стратегія, яку вчені часто використовують для виробництва РНК у лабораторії. Таким чином дослідники можуть виробляти значно велику кількість довгих РНК — щось важливе для дослідження в різних біологічних областях. Тут ми надаємо покроковий посібник для отримання довгих РНК за допомогою транскрипції in vitro. Ми також поговоримо про те, як ми можемо покращити процес, і спробуємо вирішити деякі проблеми, з якими ви стикаєтеся під час синтезу довгої РНК.
Для транскрипції in vitro необхідні кілька основних компонентів, особливо довга РНК. Ви повинні будете надати фермент, який називається РНК-полімераза, записуючий матеріал у формі нуклеотидтрифосфатів (NTP), буфер для сприяння реакції та деякий шаблон ДНК. Як це зробити крок за кроком, ви можете знайти тут:
Кілька факторів дуже важливі для нормального синтезу РНК. Найважливіше значення має кількість іонів магнію в самому буфері. РНК-полімераза потребує значної кількості магнію для підтримки належної взаємодії з матрицею ДНК і подальшого згортання РНК. Другим важливим аспектом, який слід враховувати, є концентрація матриці ДНК. Зокрема, ви повинні мати достатню реакцію шаблонної ДНК, щоб отримати хороший вихід РНК.
Довга РНК, звичайно, прийде зі своїми проблемами. Те, що ці проблеми можуть бути пов’язані з розпадом РНК, впливати на згортання РНК і нарощування структур, які потенційно заважають синтезу РНК. Один із способів вирішення цих проблем — налаштувати буфер, який ви берете. Для більш повної структури РНК дослідники можуть додавати різні спеціальні хімічні речовини, такі як ДТТ і п-меркаптоетанол, щоб допомогти РНК правильно згорнутися та запобігти її злипанню або злипанню.
Крім того, не всі типи довгих РНК однакові, і для деяких можуть знадобитися альтернативні методи синтезу. Існують особливі функції, які дослідникам може знадобитися додати до РНК, наприклад, додати 5 ковпачок або хвіст Poly-A. Якщо це необхідно (як пояснюється пізніше), дослідники повинні включити інші ферменти, такі як гуанілілтрансфераза та полі(А)полімераза. Потрібно також вибрати відповідний фермент РНК-полімерази, який природним чином дозволяє їм виробляти більше РНК. Як тільки має бути синтезована довга РНК, нам потрібно буде визначити найкращий стан.
Транскрипт довгих РНК in vitro Існує ряд ключових застосувань для протоколу транскриптів довгих РНК in vitro в кількох дослідженнях, аналізах і терапевтичних зусиллях. Це допомагає вченим зрозуміти структуру РНК, те, як вона працює та як вони можуть модифікувати гени за допомогою сучасних технологій. Більше того, днями — відкриття різноманітних захворювань та їх лікування, як-от найсучасніших методів РНК-терапії, — давайте повіримо, наскільки корисним може бути це читання в технології для медицини.
Використання цього протоколу має багато переваг. Метод, заснований на електрофорезі, як правило, є найбільш ефективним і рентабельним способом отримання великої кількості довгої РНК. Окрім якості РНК, хороший вихід також є важливим фактором для дослідників, який допомагає їм у дослідженні, особливо якщо їм потрібна велика кількість РНК для експериментів через високі витрати матеріалу. Крім того, транскрипція in vitro для довгої РНК зазвичай більш точна та відтворювана, ніж хімічний синтез або клітинний синтез РНК.
Yaohai BioPharma — це 10 найкращих мікробних CDMO, які включають протокол транскриптів in vitro для довгої РНК, а також регуляторні питання. У нас є система управління якістю, яка відповідає чинним стандартам GMP, а також міжнародним нормам. Наша команда експертів із регулювання володіє досконалими знаннями про глобальну нормативну базу для прискорення запуску біологічних продуктів. Ми забезпечуємо простежуваність виробничих процесів, якість продукції, а також дотримання правил FDA США та ЄС EMA. TGA Австралії та NMPA Китаю також задоволені. Yaohai BioPharma успішно пройшла перевірку на місці кваліфікованої особи Європейського Союзу (QP) для нашої системи якості GMP, а також для нашого виробництва. Крім того, ми пройшли перші сертифікаційні аудити системи управління якістю ISO9001, системи управління навколишнім середовищем ISO14001 і системи управління охороною праці ISO45001.
Компанія Yaohai Bio-Pharma, яка входить до десятки найкращих виробників біопрепаратів, є фахівцем у галузі мікробної ферментації. Ми створили передове підприємство, яке оснащене сучасним обладнанням і потужними виробничими можливостями RD. У нас є п’ять ліній виробництва лікарських речовин, які відповідають вимогам GMP для мікробної ферментації та очищення, а також дві автоматизовані лінії розливу для картриджів, флаконів, а також наповнених шприців. Доступні масштаби бродіння варіюються від 10 л до 100 л, 500 л і 1000 л. Протокол стенограми in vitro для довгої РНК для отворів становить від 2000 мл до 1 мл, тоді як специфікації наповнення попередньо заповнених шприців і картриджа охоплюють 25-1 мл. Наша виробнича майстерня відповідає вимогам cGMP і гарантує постійне постачання клінічних зразків, а також комерційних товарів. Наш завод виробляє великі молекули, які відправляються по всьому світу.
Yaohai Bio-Pharma має досвід у виробництві біопрепаратів, створених з мікроорганізмів. Ми пропонуємо індивідуальні рішення RD, а також виробничі послуги, мінімізуючи потенційні ризики. Ми працювали з різними методами, такими як рекомбінантні клітинні субодиниці, вакцини (включаючи пептиди), фактори росту, гормони та протокол транскриптів in vitro для довгих РНК. Ми є фахівцями з багатьох мікроорганізмів, таких як позаклітинна та внутрішньоклітинна секреція дріжджів (вихід до 15 г/л), внутрішньоклітинні розчинні бактерії та тільця включення (вихід до 10 г/л). Ми також розробили платформу ферментації BSL-2 для створення бактеріальних вакцин. Ми маємо досвід удосконалення виробничих процесів, що сприяє збільшенню врожайності та зниженню витрат. У нас є високоефективна технологічна команда, яка забезпечує своєчасну та якісну реалізацію проектів. Це допомагає нам швидше представити ваші унікальні продукти на ринку.
Yaohai Bio-Pharma є провідним виробником протоколу транскриптів in vitro для довгої РНК CDMO. Нашою основною метою є виробництво мікробних вакцин і терапевтичних засобів для лікування домашніх тварин, людей і ветеринарів. Ми володіємо передовими технологічними платформами для дослідницької роботи та виробництва, які охоплюють увесь виробничий процес від створення мікробних штамів до обробки клітинних банків і розробки методів до клінічного та комерційного виробництва, гарантуючи, що ми можемо забезпечити успішне постачання найпередовіших рішень. Ми накопичили величезну кількість знань у галузі біообробки мікробів. Успішно завершено понад 200 проектів, і ми допомагаємо нашим клієнтам дотримуватися нормативних актів, таких як FDA США, а також EMA ЄС. Ми також допомагаємо їм орієнтуватися в Австралії TGA та Китаї NMPA. Завдяки нашому досвіду та знанням ми можемо швидко реагувати на вимоги ринку та пропонувати індивідуальні послуги CDMO.