Plazmid: Küçük Dairesel Bir DNA Molekülü Fakat Büyük Potansiyel

Plazmidler, küçük dairesel DNA molekülleri olarak, moleküler biyoloji araştırmalarında ve gen terapisinde DNA yeniden kombinasyonu için temel vektörler olarak hizmet eder. Plazmidlerin verimi ve kalitesi kritik öneme sahiptir; bunun iki önemli etkeni süper sarılı oran ve endotoksin içeriğidir.

Plazmid Alt Tipleri

Escherichia coli (E. coli)’dan çıkarılan plazmidler çeşitli alt tiplerde bulunur: süper sarılı (SC), açık çember (OC) ve doğrusal (L) formlar (Şekil 1). Bunların arasında süper sarılı plazmidler, mükemmel stabilite, antijenlik ve yüksek transfeksiyon ve ifade verimliliği gösterir.

Şekil 1. Ortak Plazmid Alt Tiplerinin Şematik Diyagramı

Plazmid DNA’nın agaroz jel elektroforezinde göç hızı sırası süper sarılı DNA, doğrusal DNA ve açık çemberli DNA’dır (Şekil 2).

Şekil 2. Farklı Plazmid Alt Tiplerinin Agaroj Gel Elektroforezdeki Göç Deseni

Yaohai Bio-Pharma, transfeksiyon seviyesi plazmidlerin süperkatelen oranını %85 ve araştırma seviyesi plazmidlerin oranını %50'ye kadar çıkarmak için süreçlerini ve tekniklerini sürekli geliştirmiştir. Aşağıdaki bir durum gösterimidir (Şekil 3), burada süperkatelen oranını tespit etmek için agaroz jel elektroforesi ile Gel-Pro Analyzer yazılımı birlikte kullanılmaktadır.

Şekil 3. Plazmid Süperkatelen Oranı Kalite Denetimi Sonuçları

Endotoksin

Endotoksin, Gram-eksi bakterilerin hücre duvarının bir bileşeni olup, zehirlilik bileşeni olarak esasen lipopolisakarit A (LPS-A)'dan oluşur. Plazmid çıkarımı sırasında endotoksin lizis çözeltisine salınır ve bu da hücrelere plazmid transfeksiyonunun verimliliğini ciddi şekilde etkileyebilir. Ayrıca, hücrelerde spesifik olmayan immün yanıtlarını aktive edebilir ve deneylerde yanlış pozitif sonuçlara neden olabilir.

Yaohai Bio-Pharma, "sokma yok" ve "yüksek kaldırma" yaklaşımını benimser ve tüm temizleme sürecinde endotoksin içeren reaktifler ve malzemelerin kullanımını sıkı bir şekilde kontrol eder. Şirket aynı zamanda verimli bir endotoksin kaldırma yöntemini geliştirdi ve üç farklı seviyede endotoksin içeriği sunar: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg ve ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma, yüksek kapasiteli plazmid çıkarma hizmeti çizgisi sahibidir ve yalnızca bir hafta içinde 1 mg çıkarılmış plazmid teslim edebilir. Varsayılan olarak, kalite kontrolü (QC) için yedi kadar testten daha fazlasını sunarak, birden fazla açıdan yüksek kaliteli ve standartlı plazmlidlerin teslimini sağlar.

Ayrıca, kurumsal veya bireysel küresel ortaklar arayışındayız. Endüstride en rekabetçi müsadereyi sunuyoruz. Herhangi bir sorunuz varsa, lütfen bizimle iletişime geçmeyi çekinmeyin: [email protected]