Plazmid: Malá kruhová DNA molekula s veľkým potenciálom

Plazmidy, malé kruhové DNA molekuly, slúžia ako základné vektory pre rekombináciu DNA v štúdiu molekulárnej biológie a genovej terapii. Výnos a kvalita plazmídu sú kľúčové, pričom podiel superzakriveného plazmídu a obsah endotoxínov sú dvoma dôležitými faktormi ovplyvňujúcimi kvalitu plazmídu.

Podtypy plazmíd

Plazmidy extrahované z Escherichia coli (E. coli) existujú vo viacerých podtypoch: superzakrivené (SC), otvorené kruhové (OC) a lineárne (L) formy (Obrázok 1). Medzi nimi majú superzakrivené plazmidy vynikajúcu stabilitu, antigenicitu a vysokú účinnosť transfekcie a expresie.

Obrázok 1. Schéma bežných podtypov plazmíd

Pri elektroforeze plazmidovej DNA v agárovoj žliabke je poradie rýchlosti migrácie superzakrivená DNA, lineárna DNA a otvorená kruhová DNA (Obrázok 2).

Obrázok 2. vzor migrácie pri elektroforeze agárovej žliavky rôznych podtypov plazmíd

Yaohai Bio-Pharma neustále vylepšuje svoje procesy a techniky, aby sa zabezpečilo, že podiel superzieľových plazmidov pre transfekciu je ≥85% a pre výskumné plazmídy je ≥50%. Nasledujúci je príklad demonštrácie (Obrázok 3), kde je kombinovaná agársová gelová elektroforeza s softvérmi Gel-Pro Analyzer na detekciu podielu superzieľových plazmidov.

Obrázok 3. Výsledky kontroly kvality podielu superzieľových plazmidov

Endotoxín

Endotoxín, komponent steny gramnegatívnych baktérií, sa hlavne skladá z lipopolysacharidu A (LPS-A) ako svojho toxického komponentu. Počas extrakcie plazmidov sa endotoxín uvoľní do lizátu, čo vážne ovplyvňuje účinnosť transfekcie plazmidov do buniek. Okrem toho môže aktivoovať nespecifické imunitné odpovede v bunkách, čo môže spôsobiť falošne pozitívne výsledky v experimentoch.

Yaohai Bio-Pharma používa prístup "bez pridávania" a "vysokého odstránenia", striktno kontrolujúc použitie reagentov a materiálov obsahujúcich endotoxín v celom procese čistenia. Spoločnosť tiež vyvinula efektívnu metódu na odstránenie endotoxínu, ponúkajúc tri úrovne obsahu endotoxínu: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg a ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma disponuje službou vysokoprodukčného extrahovania plazmidov, ktorá dokáže dodávať 1 mg extrahovaných plazmidov už po jednom týždni. Štandardne poskytuje viac ako sedem testov kvality (QC), aby sa zabezpečilo dodanie plazmidov vysoké kvality a štandardu z viacerých hľadísk.

Hľadáme tiež aktívne globálnych partnerov, či už institucionálnych alebo jednotlivcov. Ponúkame najkonkurenceschopnejšie odškodnenie v odvetví. Ak máte akékoľvek otázky, neváhejte nás kontaktovať: [email protected]