Využitie bakteriálnych IB na produkciu rekombinantného proteínu

Bakteriálne inklúzne telieska (IB) pri produkcii rekombinantných proteínov ponúkajú ľahkú separáciu, stabilitu, vysokú expresiu a odolnosť voči degradácii a môžu exprimovať toxické proteíny s biologickou aktivitou. Pokroky v porozumení IB otvárajú nové cesty pre spracovanie s výzvami a riešeniami identifikovanými pre budúci výskum.

Yaohai Bio-Pharma má viac ako 10 rokov skúseností s výrobou rekombinantných proteínov pomocou mikrobiálnych fermentačných systémov. Náš silný a profesionálny tím odborníkov zaručuje, že purifikovaný refoldovaný proteín môže dosiahnuť 1.5 g/l.

Stratégie spracovania a výzvy IB

Oddelenie IB Metódy separácie IB závisia od štruktúry a funkcie proteínu a potrieb aplikácie. Fyzikálne metódy narúšajú bunky, ale môžu poškodiť kvalitu bielkovín. Enzymatické metódy zlepšujú čistotu, ale sú nákladné. Jemné pracie prostriedky fungujú pre klasické IB, nie pre neklasické. Kontrola pH je rozhodujúca pre rozpustnosť. Depozícia elektroforézou je jednoduchá, ale nie je škálovateľná pre biologicky aktívne proteíny.

Solubilizácia IB Solubilizácia IB je rozhodujúca pre regeneráciu aktívnych proteínov. Silné denaturanty poškodzujú prirodzenú štruktúru, zatiaľ čo nedenaturanty nie sú vhodné pre klasické IB. Jemné solubilizátory môžu rozpustiť IB a zároveň chrániť proteínovú štruktúru, ale nie všetky proteíny. Budúca práca si vyžaduje lepšie algoritmy na výber solubilizátorov.

Renaturačné stratégie Proteínová renaturácia je životne dôležitá pre funkčnosť. In vitro renaturácia čelí výzvam. Výber solubilizátora, koncentrácia proteínu, podmienky a metódy ovplyvňujú výsledok. Jemné solubilizátory chránia prirodzenú štruktúru a zlepšujú kvalitu. Mierne koncentrácie a optimalizované podmienky znižujú agregáciu. Stĺpcové metódy s monolitickými matricami ponúkajú vyššiu čistotu a výťažok.

Čistenie renaturovaných proteínov Ďalšia purifikácia oddeľuje nesprávne poskladané proteíny od správne poskladaných proteínov. Tradičná chromatografia zápasí s podobnými proteínmi. Alternatívne metódy ponúkajú výhody, ale vyžadujú selekciu špecifickú pre cieľový proteín. Výzvou zostáva vývoj univerzálnej metódy čistenia.

záver

IB ponúkajú výhody pri produkcii rekombinantných proteínov, ale predstavujú výzvy pri spracovaní. S hlbším porozumením proteínovej štruktúry a funkcie v rámci IB a pokrokmi v separácii, solubilizácii, renaturácii a purifikácii možno čoskoro dosiahnuť vysokovýkonnú regeneráciu aktívnych proteínov. Tým sa znížia náklady a urýchli biofarmaceutický výskum a vývoj, čo povedie k rastu priemyslu.

Yaohai Bio-Pharma tiež aktívne hľadá inštitucionálnych alebo individuálnych globálnych partnerov a ponúka najkonkurencieschopnejšiu kompenzáciu v tomto odvetví. Ak máte akékoľvek otázky, neváhajte nás kontaktovať: [email protected]

Viac podrobností o Yaohai Bio-Pharma nájdete na webovej stránke: www.yaohaibio-pharma.com