Využitie bakteriálnych IB pre produkciu rekombinantných bílkovín

Bakteriálne inklúziové telieska (IBs) v produkcií rekombinantných bílkovín ponúkajú jednoduchosť oddelenia, stabilitu, vysoké vyjadrenie a odolnosť pred rozkladom, a môžu vyjadrovať toxické bílkoviny s biologickou aktivitou. Postupné pochopenie IB otvára nové cesty pre spracovanie, pričom boli identifikované výzvy a riešenia pre budúcu výskumnú činnosť.

Yaohai Bio-Pharma má viac ako 10 rokov skúseností v produkcií rekombinantných bílkovín pomocou mikrobiálnych fermentačných systémov. Náš silný a profesionálny tímový tím odborníkov zabezpečuje, že vyčistená refoldnutá bílkovina môže dosiahnuť 1,5 g/L.

Strategie a výzvy spracovania IB

Oddelenie IB Metódy na oddelenie IB závisia od štruktúry-funkcie bílkovín a potrieb aplikácií. Fyzikálne metódy rušia bunky, ale môžu poškodiť kvalitu bílkovín. Enzymatické metódy zlepšujú čistotu, ale sú nákladné. Mäkké detergenty fungujú pre klasické IB, nie však pre neklasické. Riadenie pH je kľúčové pre rozpúšateľnosť. Elektroforéznym nánosom je jednoduché, ale nie je škálovateľné pre biologicky aktívne bílkoviny.

Rozpúštanie IB Rozpúštanie IB je kľúčové pre získavanie aktívnych bílkovín. Silné denatúranti poškodzujú natívnu štruktúru, zatiaľ čo nenatatúranti nie sú vhodné pre klasické IB. Mäkké rozpúštače môžu rozpúšťať IB pri záchytení štruktúry bílkovín, ale nie všetky bílkoviny. Budúca práca vyžaduje lepšie algoritmy na výber rozpúštačov.

Stratégie renatúracie Renatúrancia bílkovín je životne dôležitá pre ich funkčnosť. In vitro renatúrancia stretáva problémy. Výber rozpúšťadla, koncentrácia bílkovín, podmienky a metódy majú vplyv na výsledok. Mäkké rozpúšťadlá chránia prirodzenú štruktúru a zlepšujú kvalitu. Umiernené koncentrácie a optimalizované podmienky znížia agregáciu. Slúpcové metódy s monolitickými matricami ponúkajú vyššiu čistotu a výnos.

Čistenie renaturovaných bílkovín Ďalšie čistenie oddelí neprávne svinuté bílkoviny od správne svinutých. Tradičná chromatografia má problémy s podobnými bílkovinami. Alternatívne metódy ponúkajú výhody, ale vyžadujú výber špecifický pre cieľovú bílkovinu. Vývoj univerzálnej metódy čistenia stále zostáva výzvou.

Záver

IBs ponúkajú výhody v produkcií rekombinantných bílkovín, ale predstavujú aj zložitosti v procese. S hlbším pochopením štruktúry-funkcie bílkovín v IBs a pokrokom v oddelení, rozpúšťaní, renatúrácii a čistení môže byť nákladné získavanie aktívnych bílkovín vysokého prúdenia skôr dosiahnuteľné. To sníži náklady a akceleruje vývoj biolfarmaceutických produktov, čo podporí rast odvetvia.

Yaohai Bio-Pharma aktivne hľadá globálnych partnerov, ktorí sú inštitúciami alebo jednotlivcami, a ponúka najkonkurenceschopnejšie odmeny v odvetví. Ak máte akékoľvek otázky, neváhajte nás kontaktovať: [email protected]

Pre viac informácií o Yaohai Bio-Pharma sa prosím pozriete na webovú stránku: www.yaohaibio-pharma.com