Все Категории
ENEN
Услуги по приготовлению белков без меток

Услуги по приготовлению белков без меток

Главная >  Услуги по приготовлению белков без меток

Процесс подачи заявки

Услуги по приготовлению белков без меток

Белковые метки, как партнеры слияния, используемые в технологиях рекомбинантной ДНК, обеспечивают эффективную одноэтапную аффинную очистку различных белков/пептидов с различными характеристиками. Несмотря на это важное преимущество, метки в виде экзогенных аминокислот могут изменять структуру и биологические функции белка. Следовательно, немеченые (без меток) белки или пептиды более предпочтительны для обеспечения безопасности и эффективности, особенно в области биофармацевтики. Рекомбинантный белок со слитой меткой имеет ограниченные возможности для получения разрешения от медицинских учреждений/органов по администрированию лекарств.

Основываясь на платформе исследований и разработок в области микробных биологических препаратов, компания Yaohai Bio-Pharma предлагает индивидуальные услуги по приготовлению немеченых (Tag-free) белков, предназначенных для достижения уникальных целей исследований, разработок и производства для клинического использования.

Ключевые слова: производство белка без меток, очистка немеченых белков, получение белков на основе свободных меток, экспрессия и очистка белков без меток, целевой белок с высокой степенью отсутствия меток. Применение: исследования в медицине человека, разработка лекарств для животных, разработка рекомбинантных вакцин, рекомбинантные большие молекулы. производство биопрепаратов


Наша платформа микробных исследований и разработок

У нас есть опыт в разработке микробных штаммов, ферментации и очистке продуктов.

Бактерии: кишечная палочка (E.coli)

Дрожжи: Pichia Pastoris (P. Pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula Polymorpha (H. Polymorpha).

Индивидуальные параметры

МодальностьРекомбинантный белок
Исходные материалыПоследовательности генов, рекомбинантные плазмиды или сконструированные штаммы
РезультатОчистка: >80%, >85%, >90% Количество: 0.2~10 г (определяется проектом)
Система экспрессии и формированиеПериплазматическая секреция E. coli, экспрессия растворимых телец и телец включения; Внутриклеточная экспрессия дрожжей или секреция
Методы анализаУльтрафиолетовый (УФ), анализ бицинхониновой кислоты (BCA), по методу Брэдфорда или Лоури для определения количества. Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) для очистки. Опционально: вестерн-блоттинг (WB), твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), высокоэффективный. жидкостная хроматография (ВЭЖХ)
Остаточные примесиЭндотоксин (необязательно)

Подробности об услугах

УслугиСервис ПодробнееМинимальные сроки (рабочий день)
Синтез геновОптимизация кодонов для конкретного хозяина экспрессии7 ~ 10 дней
Синтез генов
Плазмидная/векторная конструкцияКлонирование в плазмиду/вектор2 дней
Плазмидная трансформация
Проверка полимеразной цепной реакции (ПЦР), расщепление ферментами рестрикции, секвенирование генов3 дней
Экспрессия белка в E. coliПлазмидная трансформация,2 дней
Культивирование во встряхиваемой колбе3 дней
7L-мешковая ферментация, оптимизация4 дня/партия
Очистка белков без меток, оптимизация5~10 дней/партия
Тестирование с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE)
Экспрессия белка в дрожжахПодготовка дрожжевых компетентных клеток4 дней
Плазмидная линеаризация и электротрансформация
7L-мешковая ферментация, оптимизация5 дней
Очистка белков без меток, оптимизация7 дней/партия
Очистка белка без меток5~10 дней/партия
Контроль качества по SDS-PAGE

Дополнительные услуги (по желанию)

Разработка процесса ферментации

Разработка процесса очистки белков без меток

Пилотное масштабирование и производство в соответствии с требованиями GMP

Анализ и тестирование

Наши функции

Мы работали над более чем 300 инженерными штаммами микробов, включая E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. пасторис SMD1168H, X-33, GS115; штамм PichiaPink1/2/3/4; и H.polymorpha.

У нас есть опыт периплазматической секреции E. coli, экспрессии растворимых телец и телец включения, а также внутриклеточной или секреторной экспрессии дрожжей.

Мы создаем высокопроизводительную платформу для скрининга высокопродуктивных и стабильных штаммов из более чем ста штаммов-кандидатов.

Получите бесплатную цитату

Контакты