A Magia de P. pastoris: Moldando a Produção de Proteínas Recombinantes

Proteínas recombinantes, que são proteínas expressas em células hospedeiras por meio de técnicas de engenharia genética, encontraram amplas aplicações na pesquisa biomédica, terapia e diagnóstico. A seleção de um sistema de expressão apropriado é um fator crucial para o sucesso na expressão de proteínas recombinantes.

A Yaohai Bio-Pharma possui mais de uma década de experiência na construção de bibliotecas de cepas de leveduras e produção. Neste artigo, a Yaohai detalhará os aspectos do sistema de expressão de Pichia pastoris (P. pastoris) para proteínas recombinantes.

P. pastoris como sistema de expressão de proteína recombinante

P. pastoris, como uma levedura metilotrófica, é capaz de utilizar eficientemente compostos C1, como metanol, tornando-a um hospedeiro ideal para a produção de proteínas recombinantes. O processo envolve introduzir um vetor contendo o DNA alvo na levedura, aproveitando as propriedades celulares eucarióticas da levedura para expressar a proteína recombinante. O sistema de expressão genética heteróloga usando P. pastoris como hospedeiro desenvolveu-se rapidamente nos últimos anos e é reconhecido como uma ferramenta importante e amplamente aceita na biologia molecular para a produção de proteínas recombinantes.

Estratégia para o P. pastoris sistema de Expressão

Estratégias de otimização para P. pastoris processos de fermentação

Para aumentar a eficácia dos processos de fermentação, integrar manipulações de cepas e adotar várias estratégias durante a fermentação de P. pastoris é crucial. Embora condições comumente usadas para a fermentação de P. pastoris existam, as condições ótimas são altamente dependentes do produto desejado, da composição genética empregada e se a regulação do produto é alcançada por meio de um promotor constitutivo ou induzível. Fatores-chave para melhorias bem-sucedidas, otimização e simulação em P. pastoris incluem o ajuste de parâmetros de fermentação, seleção de modos operacionais e uso de modelos matemáticos. A otimização do processo de fermentação envolve selecionar precisamente parâmetros como temperatura, pH, composição do meio e oxigênio dissolvido, além de adotar modos operacionais adequados, como fermentação contínua e por lote alimentado. Além disso, modelos metabólicos de larga escala e métodos matemáticos podem ser utilizados para aprimorar a otimização do processo de fermentação.

Conclusão

Em comparação com bactérias, P. pastoris, como um organismo eucariota, apresenta vantagens únicas no processo de fermentação. Portanto, P. pastoris é reconhecido como uma plataforma microbiana principal para a produção de proteínas recombinantes. Para alcançar alta produtividade da proteína desejada, é necessária a otimização do processo.

O desenvolvimento eficiente e rápido do banco de células é crucial para o processo de lançamento do produto. Se você precisar de construção de P. pastoris ou outras cepas de leveduras, a Yaohai pode fornecer ampla experiência na construção de bancos de células microbianas, orientação regulatória profissional, além de serviços CDMO integrados. Projetamos uma rota de desenvolvimento razoável que minimiza o ciclo de desenvolvimento CMC de produtos biológicos recombinantes enquanto evita riscos.

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