A magia de P. pastoris: moldando a produção de proteínas recombinantes

Proteínas recombinantes, que são proteínas expressas em células hospedeiras por meio de técnicas de engenharia genética, encontraram aplicações generalizadas em pesquisa biomédica, terapia e diagnóstico. A seleção de um sistema de expressão apropriado é um fator crucial na expressão bem-sucedida de proteínas recombinantes.

A Yaohai Bio-Pharma ostenta mais de uma década de experiência na construção e produção de bibliotecas de linhagens de levedura. Neste artigo, a Yaohai elaborará os detalhes do sistema de expressão de proteína recombinante Pichia pastoris (P. pastoris).

P.pastoris como sistema de expressão de proteína recombinante

P. pastoris, como uma levedura metilotrófica, é capaz de utilizar eficientemente compostos C1 como o metanol, tornando-a uma hospedeira ideal para a produção de proteínas recombinantes. O processo envolve a introdução de um vetor carregando o DNA alvo na levedura, alavancando as propriedades celulares eucarióticas da levedura para expressar a proteína recombinante. O sistema de expressão gênica heteróloga usando P. pastoris como hospedeira se desenvolveu rapidamente nos últimos anos e é reconhecido como uma ferramenta importante e amplamente aceita em biologia molecular para a produção de proteínas recombinantes.

Estratégia para o P.pastoris sistema de expressão

Estratégias de otimização para P.pastoris processos de fermentação

Para aumentar a eficácia dos processos de fermentação, integrar manipulações de cepas e adotar várias estratégias durante a fermentação de P. pastoris é crucial. Embora existam condições comumente usadas para fermentação de P. pastoris, as condições ótimas são altamente dependentes do produto desejado, da composição genética empregada e se a regulação do produto é alcançada por meio de um promotor constitutivo ou induzível. Os principais fatores para melhoria, otimização e simulação bem-sucedidas em P. pastoris incluem o ajuste de parâmetros de fermentação, seleção de modos operacionais e utilização de modelos matemáticos. Otimizar o processo de fermentação envolve selecionar precisamente parâmetros como temperatura, pH, composição do meio e oxigênio dissolvido, bem como adotar modos operacionais adequados, como fermentação contínua e em batelada alimentada. Além disso, modelos metabólicos em escala de genoma e métodos matemáticos podem ser alavancados para refinar a otimização do processo de fermentação.

Conclusão

Comparado com bactérias, P. pastoris, como um organismo eucariótico, exibe vantagens únicas no processo de fermentação. Portanto, P. pastoris é reconhecido como uma importante plataforma microbiana para a produção de proteínas recombinantes. Para atingir o alto rendimento da proteína desejada, a otimização do processo é necessária.

O desenvolvimento rápido e eficiente do banco de células é crucial para o processo de lançamento do produto. Se você precisa de construção de P. pastoris ou outras linhagens de levedura, a Yaohai pode fornecer a você ampla experiência em construção de banco de células microbianas, orientação regulatória profissional, bem como serviços CDMO completos. Nós projetamos um roteiro de desenvolvimento razoável que minimiza o ciclo de desenvolvimento de CMC de produtos biológicos recombinantes, evitando riscos.

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