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Métodos de purificação de mRNA atualizados em 2024

23 de Outubro, 2024

A purificação, uma etapa crucial na produção de mRNA, envolve a remoção de impurezas, como produtos químicos que não reagiram ou materiais residuais.

O processo de purificação garante a consistência de lote para lote das formulações de mRNA e nanopartículas lipídicas (LNP), removendo componentes instáveis ​​e, assim, melhorando sua biodisponibilidade e eficácia in vivo.

Aqui estão vários métodos comuns de purificação:

1. Precipitação de cloreto de lítio: O RNA forma complexos com cloreto de lítio e álcool, precipitando, seguido de centrifugação para separar o precipitado de RNA para purificação;

2. Purificação de esferas magnéticas: Esferas magnéticas modificadas na superfície se ligam seletivamente ao RNA, permitindo uma purificação rápida e eficiente por meio de movimento controlado com um campo magnético;

3. Cromatografia de afinidade: Utilizando a afinidade entre mRNA polyA e oligo dT para capturar RNA e remover impurezas;

4. Cromatografia de troca iônica: Aproveitando as diferenças nas interações entre o RNA e os grupos de troca iônica, a separação e a purificação do RNA são obtidas ajustando a força iônica e o pH na coluna de troca iônica.

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