métodos de Purificação de mRNA Atualizados em 2024

A purificação, um passo crucial na produção de mRNA, envolve a remoção de impurezas, como produtos químicos não reagidos ou materiais residuais.

O processo de purificação garante consistência entre lotes de mRNA e formulações de nanopartículas lipídicas (LNP), removendo componentes instáveis e melhorando assim sua biodisponibilidade e eficácia in vivo.

Aqui estão vários métodos comuns de purificação:

1. Precipitação com cloreto de lítio : O RNA forma complexos com cloreto de lítio e álcool, precipitando, seguido por centrifugação para separar o precipitado de RNA para purificação;

2. Purificação com partículas magnéticas: Partículas magnéticas modificadas na superfície se ligam seletivamente ao RNA, permitindo uma purificação rápida e eficiente através do movimento controlado com um campo magnético;

3. Cromatografia de afinidade: Utilizando a afinidade entre o poliA do mRNA e o oligo dT para capturar o RNA e remover impurezas;

4. Cromatografia de troca iônica: Aproveitando as diferenças nas interações entre RNA e grupos de troca iônica, a separação e purificação do RNA são alcançadas ajustando a força iônica e o pH na coluna de troca iônica.

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