Aproveitando IBs bacterianos para produção de proteína recombinante

Corpos de inclusão bacteriana (IBs) na produção de proteína recombinante oferecem facilidade de separação, estabilidade, alta expressão e resistência à degradação, e podem expressar proteínas tóxicas com atividade biológica. Avanços na compreensão de IB abrem novos caminhos para o processamento, com desafios e soluções identificados para pesquisas futuras.

A Yaohai Bio-Pharma tem mais de 10 anos de experiência na produção de proteínas recombinantes usando sistemas de fermentação microbiana. Nossa equipe forte e profissional de especialistas garante que a proteína redobrada purificada pode atingir 1.5 g/L.

Estratégias de processamento e desafios dos IBs

Separação de IBs Os métodos para separação de IB dependem da estrutura-função da proteína e das necessidades de aplicação. Os métodos físicos rompem as células, mas podem prejudicar a qualidade da proteína. Os métodos enzimáticos melhoram a pureza, mas são caros. Detergentes suaves funcionam para IBs clássicos, não para não clássicos. O controle do pH é crucial para a solubilidade. A deposição por eletroforese é simples, mas não escalável para proteínas biologicamente ativas.

Solubilização de IBs Solubilizar IBs é crucial para recuperar proteínas ativas. Desnaturantes fortes danificam a estrutura nativa, enquanto não desnaturantes não são adequados para IBs clássicos. Solubilizantes suaves podem dissolver IBs enquanto protegem a estrutura da proteína, mas não todas as proteínas. Trabalhos futuros precisam de algoritmos melhores para selecionar solubilizantes.

Estratégias de renaturação A renaturação de proteínas é vital para a funcionalidade. A renaturação in vitro enfrenta desafios. A escolha do solubilizador, a concentração de proteínas, as condições e os métodos afetam o resultado. Os solubilizadores suaves protegem a estrutura nativa e melhoram a qualidade. Concentrações moderadas e condições otimizadas reduzem a agregação. Os métodos baseados em colunas com matrizes monolíticas oferecem maior pureza e rendimento.

Purificação de proteínas renaturadas Purificação adicional separa proteínas mal dobradas de proteínas corretamente dobradas. A cromatografia tradicional tem dificuldades com proteínas semelhantes. Métodos alternativos oferecem vantagens, mas exigem seleção específica da proteína alvo. Desenvolver um método de purificação universal continua sendo um desafio.

Conclusão

IBs oferecem vantagens na produção de proteína recombinante, mas apresentam desafios de processamento. Com uma compreensão mais profunda da estrutura-função da proteína dentro de IBs e avanços na separação, solubilização, renaturação e purificação, a recuperação de alto rendimento de proteínas ativas pode ser alcançada em breve. Isso reduzirá os custos e acelerará a P&D biofarmacêutica, impulsionando o crescimento da indústria.

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