Utilização de IBs Bacterianos na Produção de Proteínas Recombinantes

Corpos de inclusão bacterianos (IBs) na produção de proteínas recombinantes oferecem facilidade de separação, estabilidade, alta expressão e resistência à degradação, e podem expressar proteínas tóxicas com atividade biológica. Avanços no entendimento dos IBs abrem novas vias para processamento, com desafios e soluções identificadas para pesquisas futuras.

A Yaohai Bio-Pharma possui mais de 10 anos de experiência na produção de proteínas recombinantes usando sistemas de fermentação microbiana. Nossa forte equipe de especialistas garante que a proteína refoldada purificada possa atingir 1,5 g/L.

Estratégias de Processamento e Desafios dos IBs

Separação dos IBs Os métodos de separação de IB dependem da estrutura-função da proteína e das necessidades da aplicação. Métodos físicos rompem as células, mas podem danificar a qualidade da proteína. Métodos enzimáticos melhoram a pureza, mas são caros. Detergentes suaves funcionam para IBs clássicos, não para os não clássicos. O controle de pH é crucial para a solubilidade. A deposição por eletroforese é simples, mas não escalável para proteínas biologicamente ativas.

Solubilização de IBs A solubilização de IBs é crucial para recuperar proteínas ativas. Denaturantes fortes danificam a estrutura nativa, enquanto denaturantes não agressivos não são adequados para IBs clássicos. Solubilizadores suaves podem dissolver IBs enquanto protegem a estrutura da proteína, mas nem todas as proteínas. Trabalhos futuros precisam de melhores algoritmos para selecionar solubilizadores.

Estratégias de Renatuação A renatuação de proteínas é vital para a funcionalidade. A renatuação in vitro enfrenta desafios. A escolha do solubilizante, a concentração de proteína, as condições e os métodos afetam o resultado. Solubilizantes suaves protegem a estrutura nativa e melhoram a qualidade. Concentrações moderadas e condições otimizadas reduzem agregação. Métodos baseados em coluna com matrizes monolíticas oferecem maior pureza e rendimento.

Purificação de Proteínas Renaturadas A purificação adicional separa proteínas mal dobradas das corretamente dobradas. A cromatografia tradicional luta com proteínas semelhantes. Métodos alternativos oferecem vantagens, mas exigem seleção específica para a proteína-alvo. Desenvolver um método de purificação universal ainda é um desafio.

Conclusão

As IBs oferecem vantagens na produção de proteínas recombinantes, mas apresentam desafios no processamento. Com uma compreensão mais profunda da estrutura-função da proteína dentro das IBs e avanços em separação, solubilização, renaturação e purificação, pode-se alcançar em breve a recuperação de alta throughput de proteínas ativas. Isso reduzirá custos e acelerará o desenvolvimento e a pesquisa de biofármacos, impulsionando o crescimento da indústria.

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