Análise comparativa de levedura e E. coli em testes de liberação

No campo de biofármacos, Escherichia coli (E. coli) e levedura são dois sistemas de expressão microbiana amplamente utilizados que abordaram desafios significativos, como industrialização e estabilidade de lote para lote de produtos biológicos. Aproveitando suas vantagens de origens genéticas claras e tecnologia madura, eles foram utilizados na produção de vários produtos biológicos preventivos ou terapêuticos, incluindo a vacina HPV 9-valente, GLP-1, insulina e análogos de insulina, interleucina-2, interferon, DNA plasmídico na Yaohai Bio-Pharma.

Impulsionado pela necessidade de produção contínua e multilote, implementar um sistema de gerenciamento de banco de linhagens e estabelecer testes de liberação razoáveis ​​pode garantir a uniformidade e estabilidade das linhagens de produção, garantindo assim a consistência e a qualidade dos produtos biológicos. Como E. coli e levedura pertencem a bactérias e fungos, respectivamente, suas estratégias de construção molecular para linhagens projetadas diferem. Especificamente, genes exógenos em E. coli existem predominantemente como plasmídeos livres, enquanto em hospedeiros de expressão de levedura, esses genes são tipicamente integrados aos cromossomos. Consequentemente, essas diferenças fundamentais necessitam de variações nos itens de teste e padrões de liberação aplicados a bancos de células de E. coli e levedura.

A Yaohai Bio-Pharma tem mais de uma década de experiência na construção de bancos de células microbianas, incluindo os de E. coli e levedura. Aproveitando o sistema GMP (Good Manufacturing Practice) robusto e compatível, a Yaohai Bio-Pharma tem uma solução completa e completa para a construção de bancos de cepas. e entregou com sucesso mais de cem bancos de cepas certificados e qualificados para clientes em todo o mundo. Com ampla experiência, a Yaohai Bio-Pharma explicou as principais considerações nos testes de liberação de E. coli e bancos de cepas de levedura.

Diferenças entre bactérias e fungos

E. coli pertence a bactérias, enquanto levedura pertence a fungos. Esses dois organismos exibem morfologias de colônias e características bioquímicas distintas. Por exemplo, o método de coloração de Gram é adequado para identificar E. coli, mas não para identificar levedura. Em segundo lugar, no nível genético, as bactérias são caracterizadas por suas sequências conservadas de 16S rRNA, enquanto os fungos possuem 18S rRNA e regiões Internal Transcribed Spacer (ITS). A condução de 16S ou 18S combinada com sequenciamento ITS para bactérias ou fungos, respectivamente, pode identificar rapidamente informações sobre espécies microbianas. Além disso, E. coli é suscetível à contaminação por bacteriófagos (vírus que atacam bactérias), portanto, é recomendável realizar a detecção de bacteriófagos ao liberar bancos de células de E. coli.

Diferenças nas formas de existência de genes exógenos

A produção de produtos biológicos recombinantes é geralmente baseada em bactérias projetadas após modificação, que geralmente são cepas microbianas com genes exógenos. As formas de existência de genes exógenos em E. coli e sistemas de expressão de levedura são diferentes. Genes exógenos geralmente existem na forma de plasmídeos livres em E. coli, enquanto o sistema de expressão de levedura integra o gene alvo em seu cromossomo.

Diferenças nos testes de liberação entre E. coli e fermento

Com base nas características anteriores, as principais diferenças nos itens de teste de liberação entre bancos de células de E. coli e de levedura estão na morfologia da colônia, nas propriedades bioquímicas, na detecção de bacteriófagos e na identificação de genes exógenos.

Com base em um profundo conhecimento do ICH Q5D, regulamentações internacionais, bem como farmacopeia, e mais de uma década de experiência em submissões para E. coli e levedura, a plataforma QC da Yaohai Bio-Pharma estabeleceu procedimentos de teste abrangentes e padrões de liberação. A Yaohai Bio-Pharma formou fortes parcerias com instituições autorizadas internacionalmente, garantindo que nossas metodologias de teste e padrões de qualidade estejam alinhados com os requisitos de submissão da FDA, EMA, NMPA, TGA e outras regulamentações.

Abaixo, a Yaohai Bio-Pharma resumiu cuidadosamente as diferenças específicas nos testes de liberação entre E. coli e levedura para sua conveniência.

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