Análise Comparativa de Leveduras e E. coli em Testes de Liberação

No campo dos biofármacos, Escherichia coli (E. coli) e leveduras são dois sistemas de expressão microbiana amplamente utilizados que têm enfrentado desafios significativos, como a industrialização e a estabilidade de lote em lote de produtos biológicos. Aproveitando suas vantagens de antecedentes genéticos claros e tecnologia madura, eles foram utilizados na produção de vários produtos biológicos preventivos ou terapêuticos, incluindo a vacina contra o HPV de 9 valências, GLP-1, insulina e análogos de insulina, interleucina-2, interferon, DNA de plasmídeo na Yaohai Bio-Pharma.

Impulsionado pela necessidade de produção em múltiplos lotes e contínua, implementar um sistema de gerenciamento de banco de cepas e estabelecer testes de liberação razoáveis podem garantir a uniformidade e estabilidade das cepas de produção, assegurando assim a consistência e qualidade dos produtos biológicos. Como E. coli e leveduras pertencem respectivamente a bactérias e fungos, suas estratégias de construção molecular para cepas modificadas diferem. Especificamente, genes exógenos em E. coli existem predominantemente como plasmídeos livres, enquanto em hospedeiros de expressão de levedura, esses genes geralmente são integrados nos cromossomos. Consequentemente, essas diferenças fundamentais exigem variações nos itens de teste e nos padrões de liberação aplicados aos bancos de células de E. coli e levedura.

A Yaohai Bio-Pharma possui mais de uma década de experiência na construção de bancos de células microbianas, incluindo os de E. coli e leveduras. Utilizando o robusto e conformado sistema GMP (Boas Práticas de Fabricação), a Yaohai Bio-Pharma oferece uma solução abrangente de ponta a ponta para a construção de bancos de cepas, e já entregou com sucesso mais de cem bancos de cepas certificados e qualificados para clientes em todo o mundo. Com base em ampla experiência, a Yaohai Bio-Pharma explicou as principais considerações no teste de liberação de E. coli e bancos de cepas de leveduras.

Diferenças entre bactérias e fungos

E. coli pertence aos bactérias, enquanto levedura pertence aos fungos. Esses dois organismos exibem morfologias de colônias e características bioquímicas distintas. Por exemplo, o método de coloração de Gram é adequado para identificar E. coli, mas não para identificar leveduras. Em segundo lugar, no nível genético, as bactérias são caracterizadas por suas sequências conservadas de 16S rRNA, enquanto os fungos possuem 18S rRNA e regiões de Espaçador Transcrito Interno (ITS). A realização de sequenciamento de 16S ou 18S combinado com ITS para bactérias ou fungos, respectivamente, pode identificar rapidamente informações sobre espécies microbianas. Além disso, E. coli é suscetível à contaminação por bacteriófagos (vírus que atacam bactérias), portanto, recomenda-se realizar detecção de bacteriófagos ao liberar bancos de células de E. coli.

Diferenças nas formas de existência de genes exógenos

A produção de produtos biológicos recombinantes geralmente se baseia em bactérias modificadas geneticamente, que normalmente são cepas microbianas com genes exógenos. As formas de existência de genes exógenos nos sistemas de expressão de E. coli e levedura são diferentes. Genes exógenos geralmente existem na forma de plasmídeos livres em E. coli, enquanto o sistema de expressão de levedura integra o gene alvo em seu cromossomo.

Diferenças nos testes de liberação entre E. coli e levedura

Com base nas características anteriores, as principais diferenças nos itens de teste de liberação entre bancos de células de E. coli e levedura estão na morfologia da colônia, propriedades bioquímicas, detecção de bacteriófagos e identificação de genes exógenos.

Com base em uma compreensão aprofundada do ICH Q5D, regulamentações internacionais, bem como farmacopeias e mais de uma década de experiência em submissões para E. coli e leveduras, a plataforma QC da Yaohai Bio-Pharma estabeleceu procedimentos de teste abrangentes e padrões de liberação. A Yaohai Bio-Pharma formou parcerias sólidas com instituições autorizadas internacionalmente, garantindo que nossos métodos de teste e padrões de qualidade estejam alinhados com os requisitos de submissão da FDA, EMA, NMPA, TGA e outras regulamentações.

Abaixo, a Yaohai Bio-Pharma resumiu cuidadosamente as diferenças específicas nos testes de liberação entre E. coli e leveduras para sua conveniência.

Yaohai Bio-Pharma também está ativamente buscando parceiros globais institucionais ou individuais e oferece a compensação mais competitiva do setor. Se tiver alguma dúvida, sinta-se à vontade para nos contatar: [email protected]