DNA Plasmid, sebagai di luar badan templat transkripsi (IVT), adalah bahan mentah penting untuk pengeluaran mRNA. Hasil yang tinggi, kepekatan yang tinggi dan pemulihan yang tinggi DNA plasmid adalah faktor utama objektif semasa pembangunan proses plasmid.
Yaohai Bio-Pharma menawarkan penyelesaian satu henti untuk pembangunan plasmid, termasuk proses hulu (fermentasi), proses hilir (penyucian) perkembangan, pencirian proses dan pengesahan proses. Kami mempunyai pengalaman luas dalam meningkatkan hasil plasmid dan mengasingkannya daripada matriks yang kompleks dengan membangunkan dan mengoptimumkan proses fermentasi, penyucian dan pengeluaran bahan asing.
Proses biologi asas untuk pengeluaran plasmid termasuk: Escherichia coli (E. coli) fermentasi, penuaan sel dan lisis alkaline, klarifikasi, pengumpulan, proses kromatografi tiga langkah (penangkapan, penyucian sela, dan penyempurnaan), dan pengumpulan.
Butiran Perkhidmatan | Operasi Unit | Parameter |
E. coli fermentasi |
Botol Goyang | Komposisi media, antibiotik, isipadu inoculum, suhu pertumbuhan, dan sebagainya. |
Fermentor (7 L) |
Antibiotik, isipadu inoculum, suhu pertumbuhan, pH, oksigen terlarut (DO), mod pemberian makan (contohnya, fed-batch), media pemberian makan, masa fermentasi, dan sebagainya. |
|
Pendapatan sel | Mikrofiltrasi | Piawaian E. coli proses pendapatan |
Lisis sel | Pemulihan sel, lisisan alkaline, penetralan | Nisbah alkali, masa lisis |
Pemurnian | Penapisan | Penapisan kasar, 20 µm dan penapis 5 µm (dikehendaki) |
Kepekatan | Penapisan ultra, penapisan aliran tangensial | Saiz pori (atau NMWC), Tekanan Membran Trans (TMP), Flux, nisbah isi padu filtrat kepada luas membran |
Kromatografi tiga langkah | Kromatografi pemisahan saiz (SEC), atau kromatografi penapisan gel (GFC) | Panjang dan diameter kolom, komposisi buffer, isipadu injeksi, komposisi fasa mudah alir (penyerapan dan pelepasan), pH, kadar aliran, penyegerakan, pemberatan, pencucian, dan syarat elusi. |
Kromatografi afiniti (AF) | ||
Kromatografi pertukaran anion (AEX) | ||
Kepekatan | Penapisan ultra, penapisan aliran tangensial | Saiz pori (atau NMWC), Tekanan Membran Trans (TMP), Flux, nisbah isi padu filtrat kepada luas membran |
Lebih banyak Penyelesaian Proses Pemurnian Biologik |