Sintesis saRNA Kustom
MRNA yang membiak sendiri (saRNA), juga dikenali sebagai RNA replikon, mengandungi urutan mRNA penulisan dalam vitro (IVT) dan gen replase virus yang berasal daripada alphavirus atau flavivirus. Gen replase virus membolehkan pembiakan diri mRNA, yang menyebabkan peningkatan ungkapan protein dan dos RNA yang minimum dibandingkan dengan mRNA yang tidak membiak. Satu lagi aspeknya adalah saRNA adalah molekul yang agak besar (lebih dari 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma telah membina satu set teknologi sintesis mRNA untuk memberi mRNA yang tidak membiak dan mRNA yang membiak sendiri (1000 nt~14000 nt), seperti reka bentuk dan optimasi urutan, IVT, penyucian, pengeringan beku dan penyampulan nanopartikel lemak (LNP). Semua produk dikeluarkan di bawah piawaian kawalan kualiti yang ketat.
Rajah 1 Ciri-ciri Struktur mRNA IVT: Konvensional, Bulat dan mRNA yang Membiak Sendiri.
Ciri-ciri Urutan mRNA yang Membiak Sendiri
RNA yang memperkuat diri terdiri daripada empat protein bukan struktur (dilabelkan sebagai nsP1, nsP2, nsP3, dan nsP4), yang berasal daripada alphavirus, virus encephalitis kuda Venezuela (VEEV). Di antara ini, nsP1 menunjukkan dua aktiviti enzimatik, iaitu GTase dan N7MTase, manakala nsP2 memiliki aktiviti RTPase, yang penting untuk menutup mRNA IVT untuk menghasilkan struktur Cap 0. Selain itu, nsP2 berfungsi sebagai protease dan helikase, memudahkan pemprosesan kompleks nsP secara keseluruhan. Fungsi tepat nsP3 masih belum jelas, tetapi ia terlibat dalam interaksi dengan pelbagai protein sel hos, dengan demikian menyumbang kepada pengurangan tanggapan antivirus yang dikeluarkan oleh hos.
Kawasan promotor subgenomik alphavirus (SGP) terletak sebelum gen minat (GOI). Elemen SGP membolehkan permulaan transkripsi GOI dengan melewatkan pembacaan urutan yang mengodekan protein nsP virus.
Rajah 2 Sintesis dan ujian sel eGFP saRNA Yaohai Bio-Pharma RNASci Platform.
Penyelesaian Kustom bagi saRNA
Protokol sintesis saRNA adalah serupa dengan mRNA: Sintesis mRNA Suai
- Reka Bentuk Urutan
- Persiapan Templat Plasmid
- transkripsi in vitro (IVT)
- penutupan Enzimatik mRNA
- penutupan Co-transkripsi mRNA
- pembersihan mRNA
- liofilisasi mRNA
- Penyampulan LNP
- Analisis dan Ujian
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
