Откривање на оптималната доза на eGFP Reporter RNA

Во молекуларната биологија и биотехнологијата, зајакнатиот зелен флуоресцентен протеин (eGFP) се појави како главен ген за известување поради неговата способност да произведува светло зелена флуоресценција на 509 nm. Овој протеин, првично изолиран од медузата Aequorea victoria, е директен маркер за откривање во клеточни култури на цицачи, што го олеснува следењето и оптимизирањето на ефикасноста на трансфекцијата. Сепак, се поставува прашањето: која е оптималната доза на eGFP-репортер РНК за да се постигнат посакуваните нивоа на изразување?

Истражувањата покажаа дека ефективноста на РНК-репортерот на eGFP во голема мера зависи од нејзината доза, особено во контекст на системи за кружна РНК (циркРНК) и самозасилувачка мРНК (саРНК). Студиите спроведени од тимот Катриен Ремаут од Наномедицинската истражувачка група на Универзитетот во Гент ја истакнаа сложената врска помеѓу дозата на saRNA и нејзината ефикасност на преведување во клетките на мрежницата. Тие открија дека ниските дози на saRNA, под прагот за вродена имунолошка активација, го олеснуваат ефикасното изразување на протеините. Ова ја нагласува важноста на прецизната контрола на дозирањето во искористувањето на целосниот потенцијал на РНК-репортерот на eGFP.

Во практична примена, најчесто користените концентрации на mRNA на eGFP може да се движат од микрограми (μg) до нанограми на микролитар (ng/μL). На пример, во експериментите со трансфекција, дозите кои се движат од 0.05 μg до 0.5 μg на mRNA на eGFP се покажаа дека даваат значајни нивоа на изразување во различни типови на клетки, при што позитивните клеточни проценти достигнуваат и до 99-100% во одредени случаи. Имено, во дози под 0.1 μg, saRNA покажува супериорни нивоа на изразување во споредба со линеарната mRNA, покажувајќи ја својата само-засилувачка предност.

Разновидноста на РНК-репортерот на eGFP не лежи само во нејзината светла и стабилна флуоресценција, туку и во нејзината приспособливост на различни експериментални поставки. Истражувачите можат фино да ја прилагодат дозата за да одговараат на нивните специфични потреби, обезбедувајќи прецизна контрола врз нивоата на генска експресија. Оваа карактеристика го прави eGFP непроценлива алатка за проучување на функцијата на гените, следење на судбината на клетките и оптимизирање на протоколите за трансфекција.

Како заклучок, оптималната доза на eGFP-репортер РНК е многу зависна од експерименталниот контекст и посакуваните резултати. Со внимателно избирање на соодветната доза, истражувачите можат да го искористат целосниот потенцијал на овој разновиден репортер ген, унапредувајќи го нашето разбирање за молекуларните механизми и поттикнувајќи ги иновациите во биотехнологијата.

Yaohai Bio-Pharma е првиот и најголемиот биолошки лек посветен на микробиолошкиот изразен систем CRDMO во Голема Кина. Посветени сме на исполнување на клиничките и комерцијалните потреби на нашите глобални клиенти за биолошки лекови, вакцини и дијагностика за човечка и ветеринарна употреба.

Исто така, активно бараме институционални или индивидуални глобални партнери. Ние нудиме најконкурентна компензација во индустријата. Ако имате какви било прашања, ве молиме слободно контактирајте не: [email protected]