Оптимизација на целоста на клетките на E. coli за производство во биофармацевтиката

Во областа на биофармацевтиките, Ешерихия коли (E. coli) играе клучна улога како дом за изразување на рекомбинантни протеини. Целоста на клетките на E. coli е од суштинско значење за добивка, квалитет и производствени трошоци на протеините. Оваа целост главно се однесува до структурата и функцијата на внатрешната мембрана (IM) и надворешната мембрана (OM).

Yaohai Bio-Pharma има 15 години искуство во ферментацијата на E. coli и изразувањето на рекомбинантен протеин. Користиме различни стратегии за да ја чуваме високата клетка целост на E. coli, при што добивката на плазмид превзедува 1г/Л во циклус на одгој на 30 часови. Се користи широка искуства во микробиот израз, Yaohai Bio-Pharma ги сумира неколку ефективни стратегии за надзор и подобрување на клетката целост на E. coli токму во биофармацевтичкиот производ.

Техники за надзор на клетката целост на E. coli

Цитометрија со течност: Користи флуоресцентни бои за диференцирање на клетечки стања, како што е пропидиум йодид за детекција на клетечка вибилост и SYTO9 за оценување на пермеабилноста на ОМ. Меѓутоа, бара високи трошоци за бои и комплексни операции.

Цветните методи: Отразуваат клетечката лизирање детектирајќи ДНК содржина, ензимска активност итн. во супернатанта, како што е користењето на китот PicoGreen и тестовите за активност на алкалин фосфатаза. Овие методи, меѓутоа, се утрувања и бараат скапи реагенти.

Високо绩效на хроматографија со течна фаза: Користена за детекција навоен линија на концентрациите на екстрацеларни производи за оценка на излевањето на ОМ. Меѓутоа, автоматизацијата му е комплексна и временската анализа е долгa.

Техники на вибрациона спектроскопија: Како што се блискина и средно инфрацрвената спектроскопија, кои имаат потенцијални aplikacii но бара преодолување на спектралните интерференции и предизвикување на анализите на податоци.

Диелектрична спектроскопија: Ја оценува целоста на мембраната со мережење на импеданцата на клетечките суспензии, што овозможува реално-времеонлиново надгледување. Поради тоа, е осетлива кон интерференција и калибрирањето е тешко.

Биосензори: Можат да засечат съставници изтекле од внатрешността на клетките или периплазма, но се среќаваат со проблеми како што се трудностите во регенерацијата на сензор.

Мерење на вискозитетот и густината: Ниски по цената и брзи во анализата, но недостигуваат изборност и захтеваат разгледување на податоци од многу серии за судење.

Фактори кои влијаат на клетечката целост

Стрainless инжењеринг: Го менува целоста на ОМ преку генетска инжењеринг, како што е мутацијата на липопротеински гени, но можеби ќе влијае врз растењето на стрainless.

Индуктивен стрес: Превисоката експресија на рекомбинантни протеини води до метаболички тегови, што го влијае врз клетечката физиологија. Затоа, потребно е разумно регулирање на нивата на експресија.

Стопа на хранење на субстратот: И превисоките и прениските стопи на хранење влијаат врз клетечката лиза и целоста на ОМ.

Температура и аерација: Високите температури и ниската достапност на кислород зголемуваат изразот на стрес и протечувањето на ОМ, соодветно, но специфичните ефекти се разликуваат.

Осмотика: Користи се за отпуштање на периплазматски белчини, но штетуваат на виабилноста на клетките, што ги ограничува нивната примена.

Заклучок: Будатните истражувања мора да се залегнат погледно во механиzmите и условите на поправка на мембраната за точна контрола на целоста на клетечката мембрана. Оптимизацијата на методите на надзор и анализата на влијајните фактори се очекува да подобрат квалитетот на производот, па туку да го држат развојот на биофармацевтската индустрија.

Сè уште активно бареме институционални или индивидуални глобални партнери. Нудиме најконкурентното вознаградување во индустријата. Ако имате било кои прашања, не се стресувайте да ни kontaktirate на [email protected]