Сите категории
Статија

Поддржувач на Методи за Модификација на Репортерски РНК

Nov 08, 2024

Кога се одбира кој метод за модификација на репортерското mRNA е предпочитен, нема окончателна одговора, бидејќи секој метод и репортерска гена има своите предности и прилагодени сценари. Еве некои од обичните методи за модификација на mRNA и репортерски гени, заедно со нивните карактеристики и пригодност.

методи за модификација на mRNA

Метилирање:

  1. m6A : Поврзано со стабилноста на mRNA, спlicing, превод и обработка на miRNA. Изазовите во детекцијата вклучуваат избор на антитела и локализација.
  2. 5' Cap Nm : Зголемува стабилноста, спlicing, полиаденилација и ядрено експорт. Помага да се разликува сам-RNA од чужероден RNA.
  3. Псевдouriлирање : Променува кодоните, зголемува стабилноста и реагира на стрес. Катализирано од псевдouriдин синтетази.

Увод на не-природни нуклеотиди:

  1. Воведени во транскрипцијата со двојна хемиска модификација. Тоа ги подобрува стабилноста, ефикасноста и изразувањето на протеините.

Извештачни Гени

  1. Ген за Зелена Флуоресцентна Протеин (GFP) : Предности: Лесно детектираем, со стабилни флуоресцентни својства, нетоксинозен за клетките, пригоден за сликирање на живи клетки. Недостатоци: Ограничен интезитет на флуоресценцијата.
  2. Подобрување на Зелената Флуоресцентна Протеин (eGFP) : Предnosti: Поголем од 6 пати светлија од дивиденскиот тип GFP, што го прави посооден како извештачен ген за проучување на генското изразување, регулација, диференцирање на клетките и локализација и транспорт на протеини во организмот.
  3. Црвено Флуоресцентни Протеини (нпр., mCherry) : Предности: Долгите влани на екситација и емисија, што резултира во помалку фон при интраклетечко сликирање, одлична флуоресцентна светлина и фотостабилност, и помалку клетечка токсинозност. Недостатоци: Можеби не се користат така често како GFP во одредени експериментални услови.
  4. Лучурас : Предности: Во присуство на АТП, магnezijум иони и кислород, може да каталитскирира окиснувањето на луциферин во оксилуциферин, што генерира биолуминесценција. Тоа е соодветно за користење како контрола за проучување на ефикасноста на транслацијата на циљните гени во мајмунски клетки, виабилност на клетките и асая за ин виво сликање.

Заклучок

Кога се одбира кој метод за модификација на репортерското мРНК е предпочитен, тоа зависи од специфичните експериментални цели, научниот контекст и експерименталните услови. На пример, ако е потребна висока чувствителност, еГФП може да биде подобар избор. Ако е потребно сликање на по-длабоки таласни должини за намалување на флуоресцентната интерференција, црвени флуоресцентни протеини како што е мЧерри може да бидат подобри. Пристапите за модификација на мРНК (на primer, зголемување на стабилноста, подобрување на ефикасноста на транслацијата) можат да се изберат според специфичните потреби.

Како првата и најголемата микробијална биолошка CRDMO во Великата Кина, Yaohai Bio-Pharma нуди интегрални персонални решенија или самостојни услуги од RNA синтеза, штамбен инжењеринг и конструирање, развој на горен и долен процес, до производство на дроговито вещество на ниво ГМП или не-ГМП, како и услуги за наполнување и завршување за различни модалитети, како što се mRNA, circRNA, плазмид RNA, рекомбинантни протеини, пептиди, ензими, едносолски антитела и VLPs за човечка и ветеринарска употреба.

Yaohai Bio-Pharma исто така активно ги бара светските партнерски институции или индивидуални партнери и нуди најконкурентното вознаграждување во индустријата. Ако имате било кои прашања, слободно ни kontaktirajte: [email protected]