Шампионирачки методи за модификација на РНК на репортер

При изборот на кој метод на модификации на мРНК на известувачот се претпочита, нема дефинитивен одговор бидејќи секој метод и репортер ген имаат свои предности и применливи сценарија. Еве неколку вообичаени методи за модификација на mRNA и гени за известување, заедно со нивните карактеристики и соодветност.

Методи за модификација на mRNA

Метилација:

1. m6A: Поврзано со стабилност на mRNA, спојување, транслација и обработка на miRNA. Предизвиците за откривање вклучуваат избор и локализација на антитела.
2. 5' Капа Nm: Ја подобрува стабилноста, спојувањето, полиаденилацијата и нуклеарниот извоз. Помага да се разликува авто-РНК од странска РНК.
3. Псевдуридилација: Ги менува кодоните, ја подобрува стабилноста и реагира на стрес. Катализиран од псеудуридин синтази.

Вовед во неприродни нуклеотиди:

1. Воведен за време на транскрипцијата со стратегија за двојна хемиска модификација. Ја подобрува стабилноста, ефикасноста и изразувањето на протеини.

Репортер Генс

1. Зелен флуоресцентен протеински ген (GFP): Предности: Лесно за откривање, стабилни флуоресцентни својства, нетоксични за клетките, погоден за сликање на живи клетки. Недостатоци: Ограничен интензитет на флуоресценција.
2. Подобрен зелен флуоресцентен протеин (eGFP): Предности: Над 6 пати посветол од дивиот GFP, што го прави посоодветен како известувачки ген за проучување на генската експресија, регулација, клеточна диференцијација и локализација и транспорт на протеини во организмите.
3. Црвени флуоресцентни протеини (на пример, mCherry): Предности: Подолги бранови должини на возбудување и емисија, што резултира со пониска позадина за време на интрацелуларното снимање, одлична осветленост на флуоресценцијата и фотостабилност и помала клеточна токсичност. Недостатоци: не може да се користи толку често како GFP во одредени експериментални услови.
4. Светулка Луцифераза: Предности: Во присуство на АТП, јони на магнезиум и кислород, може да ја катализира оксидацијата на луциферин во оксилуциферин, емитувајќи биолуминисценција. Погоден е за употреба како контрола за проучување на ефикасноста на преведувањето на целните гени во клетките на цицачите, одржливоста на клетките и тестовите за сликање in vivo.

Заклучок

При изборот на кој метод на модификации на мРНК на известувачот се претпочита, тоа зависи од специфичните експериментални цели, истражувачките позадини и експерименталните услови. На пример, ако е потребна висока чувствителност, eGFP може да биде подобар избор. Ако е потребно снимање на подолги бранови должини за да се намалат пречки во позадина, црвените флуоресцентни протеини како mCherry може да бидат посоодветни. Дополнително, врз основа на специфичните потреби за модификација на mRNA (на пример, подобрување на стабилноста, подобрување на ефикасноста на преводот), може да се избере соодветниот метод на модификација.

Како прв и најголем CRDMO за микробиолошки биолошки средства во Голема Кина, Yaohai Bio-Pharma нуди еднократно приспособени решенија или самостојни услуги кои се движат од синтеза на РНК, инженеринг и конструкција на соеви, развој на процеси нагоре и низводно, до GMP или не - Производство на лековити супстанци на ниво на GMP и услуги за пополнување и завршување за различни модалитети, како што се mRNA, circRNA, плазмид РНК, рекомбинантни протеини, пептиди, ензими, антитела од еден домен и VLP за човечка и ветеринарна употреба.

Јаохаи Био-Фарма исто така активно бара институционални или индивидуални глобални партнери и нуди најконкурентна компензација во индустријата. Ако имате какви било прашања, ве молиме слободно контактирајте не: [email protected]