Identifikasi dan Kuantitas Komposisi Lipid LNP
Pentingnya Analisis Komposisi Lipid LNP
Nanopartikel lipid (LNP), yang terdiri dari lipid kationik, kolesterol, fosfolipid, dan lipid konjugasi PEG, berfungsi sebagai sistem pengiriman utama untuk produk obat mRNA. Stabilitas dan fluiditas bilayer LNP bergantung pada sifat dan kandungan berbagai lipid yang digunakan dalam sistem formulasi. Komposisi lipid sangat penting untuk menentukan seberapa baik LNP menghantarkan obat.
Yaohai-BioPharma memberikan solusi untuk mengidentifikasi dan mengukur komposisi lipid mRNA-LNP menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi dengan metode deteksi aerosol bermuatan (HPLC-CAD).
Persyaratan Peraturan untuk Komposisi Lipid
Menurut pertimbangan peraturan WHO, “Komposisi akhir vaksin, termasuk lipid, harus dijelaskan bersama dengan jumlah komponen dalam setiap penyajian.”
Metode Analisis
Analisis |
metode |
Komposisi Lipid |
HPLC dikombinasikan dengan Corona Charged Aerosol Detector (CAD) |
Prosedur
Langkah 1. Persiapan Sampel Lipid
Pemilihan pengencer sangat penting untuk analisis komponen lipid dalam produk obat mRNA-LNP. Pengencer harus secara efektif melarutkan setiap komponen lipid dan mengganggu interaksi antara lipid dan mRNA yang dienkapsulasi. Pengencer potensial meliputi etanol, etanol/dimetil sulfoksida (DMSO), etanol/formamida, etanol/trietilamina asetat, dan lain-lain.
Langkah 2. HPLC-CAD
Kromatografi cair fase terbalik (RP-HPLC) yang dipasangkan dengan detektor aerosol bermuatan (CAD) telah dimasukkan ke dalam pengujian komposisi lipid LNP. Mengingat lipid tidak memiliki kromofor dan tidak menyerap radiasi ultraviolet (UV) tanpa derivatisasi, volatilisasi biasanya sulit dilakukan. CAD, karena lebih sensitif, dapat membedakan spektrum kandungan lipid yang lebih luas. Sebelumnya, kromatografi cair kinerja ultratinggi (UHPLC) ditambah dengan metode detektor aerosol bermuatan (CAD) diformulasikan dan diterapkan dalam analisis lipid untuk studi LNP RNA (siRNA) kecil yang mengganggu.
Langkah 3. Analisis data
Kuantitas setiap lipid dalam sampel melibatkan perhitungan yang diperoleh dari kurva standar dikalikan dengan faktor pengenceran. Proses ini menghasilkan kandungan lipid untuk setiap konstituen dalam sampel mRNA-LNP.
Kasus Analisis Komposisi Lipid LNP dengan HPLC-CAD
Berdasarkan HPLC-CAD, Yaohai-BioPharma telah mengembangkan metode yang kuat untuk analisis komponen lipid mRNA-LNP. Metode ini divalidasi linier, berulang, tepat, akurat, dan spesifik untuk formulasi LNP, yang dapat mendukung pengembangan proses, pengembangan formulasi, pengujian stabilitas dan pelepasan mRNA-LNP.
Profil kromatografi 4 lipid dengan metode HPLC-CAD Yaohai-BioPharma
Linearitas metode HPLC-CAD Yaohai-BioPharma (R2＞0.99)
EN
