Sintesis saRNA khusus
MRNA yang menguatkan diri sendiri (saRNA), juga dikenal sebagai replika RNA, mengkodekan urutan mRNA transkripsi in vitro (IVT) dan gen replikase virus yang berasal dari alphavirus atau flavivirus. Gen replikase virus memungkinkan amplifikasi diri mRNA, yang menghasilkan peningkatan ekspresi protein dan dosis RNA minimum yang diperlukan dibandingkan dengan mRNA yang tidak mengamplifikasi. Aspek lainnya adalah saRNA merupakan molekul yang relatif besar (lebih dari 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma telah menetapkan serangkaian teknologi sintesis mRNA untuk menyediakan mRNA non-amplifying dan mRNA self-amplifying (1000 nt~14000 nt), seperti desain dan optimalisasi sekuens, IVT, pemurnian, liofilisasi, dan enkapsulasi nanopartikel lipid (LNP) . Semua produk dirilis di bawah standar kontrol kualitas yang ketat.
Gbr.1 Fitur Struktural mRNA IVT: mRNA Konvensional, Melingkar, dan Memperkuat Diri.
Fitur Urutan mRNA yang menguatkan diri
RNA yang menguatkan diri terdiri dari empat protein non-struktural (disebut sebagai nsP1, nsP2, nsP3, dan nsP4), yang berasal dari alphavirus, Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV). Diantaranya, nsP1 menunjukkan aktivitas enzimatik ganda, yaitu GTase dan N7MTase, sedangkan nsP2 memiliki aktivitas RTPase, yang sangat penting untuk membatasi mRNA IVT untuk menghasilkan struktur Cap 0. Selain itu, nsP2 berfungsi sebagai protease dan helicase, memfasilitasi pemrosesan rumit seluruh kompleks nsP. Fungsi sebenarnya dari nsP3 masih sulit dipahami, namun ia terlibat dalam interaksi dengan beragam protein sel inang, sehingga berkontribusi terhadap pelemahan tanggapan antivirus yang dipasang oleh inang.
Wilayah promotor subgenomik alfavirus (SGP) terletak sebelum gen yang diinginkan (GOI). Elemen SGP memfasilitasi inisiasi transkripsi Pemerintah Indonesia dengan melewati pembacaan urutan yang mengkode protein nsP virus.
Gbr.2 Sintesis dan uji sel saRNA eGFP dari Platform Yaohai Bio-Pharma RNASci.
Solusi Khusus saRNA
Protokol sintesis saRNA mirip dengan mRNA: Sintesis mRNA khusus
- Desain Urutan
- Persiapan Templat Plasmid
- transkripsi in vitro (IVT)
- Pembatasan Enzimatik mRNA
- Pembatasan Ko-transkripsi mRNA
- Pemurnian mRNA
- Liofilisasi mRNA
- Enkapsulasi LNP
- Analisis dan Pengujian
ID
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
